Tris-EDTA抗原修復(fù)液(10×,pH9.0)品牌:JinPan | 貨號(hào):JP-8322-100ml
Tris-EDTA Buffer Antigen Retrieval, 10×, pH9.0
【保存條件】
常溫保存 3 個(gè)月有效期;4oC 保存,6 個(gè)月有效期。
【概述】
用于消除細(xì)胞或組織經(jīng)醛類試劑固定后,抗原位點(diǎn)暴露不充分所 引起的免疫染色信號(hào)減弱或假陰性情況。
Tris-EDTA 抗原修復(fù)液(pH9.0) 可以有效減少 EDTA 修復(fù)液引起的脫片現(xiàn)象。石蠟、冰凍切片均可使用。
【操作方法】
1. 對(duì)于石蠟切片:
a. 脫蠟:二甲苯 3 次,每次 3-5min→ 無水乙醇 2 次,每次 3-5min→ 95%乙醇 1 次,3-5min→90%乙醇 1 次,3-5min→ 75%乙醇 1 次,3-5min→ 蒸餾水洗 2 次,每次 3-5min。
b. 抗原修復(fù):
① 用去離子水稀釋 Tris-EDTA 抗原修復(fù)液(10×,pH9.0)至 1×;
② 將切片浸泡在抗原修復(fù)液(1×)中;95-100℃加熱約 15 min (加熱時(shí)間可以控制在 10-20min 內(nèi),最佳的加熱時(shí)間需根據(jù)不同的樣品和目的蛋白自行摸索)??乖迯?fù)液(1×)使用前需預(yù)熱到 95-100℃。加熱可以使用普通的水浴鍋,也可以使用微波爐加熱。如果使用微波爐加熱,需注意避免暴沸和過多的水分蒸發(fā)。 隨后大約在 20-30 min 內(nèi)冷卻至室溫。
③ 用免疫染色洗滌液洗滌 1-2 次,每次 3-5 min。隨后即可進(jìn)行封閉等后續(xù)的免疫染色步驟。
2. 對(duì)于冰凍切片:
① 用去離子水稀釋 Tris-EDTA 抗原修復(fù)液(10×,pH9.0)至 1×;
② 用免疫染色洗滌液洗滌切片 5min;
③ 將切片浸泡在抗原修復(fù)液 (1×)中,95-100℃加熱約 15 min (加熱時(shí)間可以控制在 10-20min 內(nèi),最佳的加熱時(shí)間需根據(jù)不同的樣品和目的蛋白自行摸索)??乖迯?fù)液(1×)使用前需預(yù)熱到 95-100℃。加熱可以使用普通的水浴鍋,也可以使用微波爐加熱。如果使用微波爐加熱,需注意避免暴沸和過多的水分蒸發(fā)。隨后大約在 20-30 min 內(nèi)冷卻至室溫。
④ 用免疫染色洗滌液洗滌 1-2 次,每次 3-5 min。隨后即可進(jìn)行封閉等后續(xù)的免疫染色步驟。
3. 對(duì)于其它樣品的抗原修復(fù),可以參考石蠟切片或冰凍切片的步驟進(jìn)行。
【注意事項(xiàng)】
1. 為了您的安全與健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
2. 本品含 Tween-20,可提高抗原的特異性識(shí)別能力,抗原修復(fù)過程中加熱時(shí)會(huì)產(chǎn)生非常細(xì)密的氣泡而呈現(xiàn)均勻的渾濁狀,屬于正?,F(xiàn)象,請(qǐng)放心使用。
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