產(chǎn)品編號
JP010755-1L
BeyoGel? Transfer Buffer (Powder, for Bis-Tris Gels)
1L
33
JP010755-10L
BeyoGel? Transfer Buffer (Powder, for Bis-Tris Gels)
10L
258
生產(chǎn)的BeyoGel? Transfer Buffer (Powder, for Bis-Tris Gels),即BeyoGel? Bis-Tris膠專用轉(zhuǎn)膜液(Powder),是一種粉末形態(tài)的安全用于Western時濕法轉(zhuǎn)膜的緩沖液。轉(zhuǎn)膜液也稱轉(zhuǎn)印緩沖液或電轉(zhuǎn)液,本轉(zhuǎn)膜液專用于Bis-Tris膠,也可用于Tris-Acetate膠。
本轉(zhuǎn)膜液可在轉(zhuǎn)膜過程中維持中性pH環(huán)境,從而保護(hù)氨基酸側(cè)鏈不受改性,防止氨基酸側(cè)鏈修飾,與使用Edman化學(xué)降解法的蛋白質(zhì)N-端測序技術(shù)兼容[1]。
對還原性蛋白進(jìn)行轉(zhuǎn)膜時,可在本轉(zhuǎn)膜液中加入0.1%的JP010737 BeyoGel? Antioxidant (400X),以促進(jìn)還原性蛋白向膜轉(zhuǎn)移。
本轉(zhuǎn)膜液由高質(zhì)量的Bicine、Bis-Tris、EDTA等試劑混合而成,為粉末裝,配制時無需調(diào)整pH值。如需20倍濃縮裝,推薦使用BeyoGel? Transfer Buffer (20X, for Bis-Tris Gels) (JP010753)。
對于Bis-Tris膠和Tris-Acetate膠,也可以使用Tris-Glycine緩沖系統(tǒng)的Western轉(zhuǎn)膜液(JP010021A或JP010021B)進(jìn)行轉(zhuǎn)膜。
本轉(zhuǎn)膜液可以回收,回收后可以再使用1-2次。
1瓶本產(chǎn)品可配制1L轉(zhuǎn)膜液。
包裝清單:
產(chǎn)品編號
產(chǎn)品名稱
包裝
JP010755-1L
BeyoGel? Transfer Buffer (Powder, for Bis-Tris Gels)
1L
JP010755-10L
BeyoGel? Transfer Buffer (Powder, for Bis-Tris Gels)
1L×10
—
說明書
1份
保存條件:
室溫保存,一年有效。
注意事項:
不推薦將還原性蛋白樣品和非還原性蛋白樣品一起進(jìn)行轉(zhuǎn)膜。對還原性蛋白進(jìn)行轉(zhuǎn)膜時,可在配制轉(zhuǎn)膜液時加入0.1%的BeyoGel? Antioxidant (400X) (JP010737)。
含有10%乙醇或甲醇的轉(zhuǎn)膜液可在印跡模塊中實(shí)現(xiàn)單塊凝膠的最佳轉(zhuǎn)移效果。如果需轉(zhuǎn)移2塊凝膠,請將乙醇或甲醇含量增加到20%,以確保蛋白的有效轉(zhuǎn)移。
本產(chǎn)品適用于Bis-Tris和Tris-Acetate凝膠系統(tǒng)的轉(zhuǎn)膜液,不適用于其它凝膠系統(tǒng)。
如果轉(zhuǎn)膜時設(shè)定的電流或電壓較大,會有比較明顯的產(chǎn)熱現(xiàn)象,即產(chǎn)生所謂的焦耳熱效應(yīng)(Joule heating),并導(dǎo)致轉(zhuǎn)膜液的電阻變小,最終影響轉(zhuǎn)膜效率、轉(zhuǎn)膜液的緩沖能力、甚至過熱時導(dǎo)致凝膠熔化或黏附在膜上。因此建議轉(zhuǎn)膜時,在轉(zhuǎn)膜槽內(nèi)用冰盒降溫,并將轉(zhuǎn)膜槽置于冰浴中。同時也可以考慮轉(zhuǎn)膜液配制好后先在4℃或者冰浴預(yù)冷。
使用本產(chǎn)品轉(zhuǎn)膜時,如果設(shè)定恒流為300mA,無論是同一個轉(zhuǎn)膜槽中1或2塊膠轉(zhuǎn)膜,電壓在開始時一般為100V左右。由于轉(zhuǎn)膜過程中,轉(zhuǎn)膜液溫度會逐漸升高,電阻變小,所以結(jié)束時電壓一般為120V左右。轉(zhuǎn)膜效率和電場強(qiáng)度(Electric field strength, 用E表示)相關(guān),而電場強(qiáng)度主要和電壓及電極之間的距離相關(guān),即E=U/d。
由于用于轉(zhuǎn)膜的電源品牌和型號的不同,一方面最高電流差異較大,另一方面功率也會有較大差別。通常大功率的電源相對貴一些,也更適合用于轉(zhuǎn)膜。比如Bio-Rad Powerpac Basic Power Supply的最大功率是75W,在設(shè)定恒流為400mA時,電壓超過187V時就會超過電源的最大功率而出現(xiàn)過載保護(hù)。有些電源會自動降低電壓或電流,有些則會報錯并停止轉(zhuǎn)膜。對于出現(xiàn)停止轉(zhuǎn)膜的情況,需要調(diào)低電流或電壓,或者選擇功率更大的電源。
轉(zhuǎn)膜時轉(zhuǎn)膜液的溫度、凝膠的參數(shù)(如數(shù)量、厚度、離子濃度、丙烯酰胺濃度等)、濾紙的厚度、同時使用的轉(zhuǎn)膜槽數(shù)量、轉(zhuǎn)膜液的離子濃度、轉(zhuǎn)膜液的體積、轉(zhuǎn)膜液使用的次數(shù)等都可能會影響電流和電壓。其中一個電泳同時使用的轉(zhuǎn)膜槽數(shù)量是最關(guān)鍵因素,如果是恒流,每增加一個轉(zhuǎn)膜槽,每個槽的電流和電壓都會相應(yīng)減少一份。如果需要同時使用2個或以上的轉(zhuǎn)膜槽,建議使用高電流的大功率電源,或者設(shè)定較低的電流或電壓進(jìn)行比較長時間的轉(zhuǎn)膜。
轉(zhuǎn)膜時,如果出現(xiàn)報錯而停止,需要根據(jù)情況查看是否是電壓或電流過載,或者是如轉(zhuǎn)膜液過多或過少、轉(zhuǎn)膜槽的短路或斷路等異常情況。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。