JP010539S
BeyoGel大分子量蛋白預(yù)制膠(Tris-Acetate, 3-8%, 15孔)
10塊
BeyoGel大分子量蛋白預(yù)制膠(Tris-Acetate) (BeyoGel? Tris-Acetate Precast PAGE Gel for High Molecular Weight Protein)是一種主要用于大分子量蛋白(40-500kDa)檢測的使用安全、便捷、高品質(zhì)的常規(guī)尺寸聚丙烯酰胺預(yù)制凝膠，采用Tris-Acetate SDS (SDS-PAGE)或Tris-Glycine (Native-PAGE)電泳緩沖系統(tǒng)可以分別進行變性和非變性蛋白凝膠電泳，僅需約60分鐘即可完成電泳并獲得非常平整銳利的條帶。本預(yù)制膠有1.5厘米高的濃縮膠，具有非常優(yōu)良的分離效果，電泳后蛋白條帶平整、清晰、細膩、銳利，幾乎沒有邊緣效應(yīng)；同時本預(yù)制膠膠板為玻璃材質(zhì)，減少了對蛋白的非特異性吸附，電泳效果非常好，達到甚至超過了自配PAGE膠的電泳效果；兼容市場上主流的小型電泳槽，常用于PAGE和Western檢測。
的BeyoGel大分子量蛋白預(yù)制膠(Tris-Acetate)提供3-8%濃度的梯度膠和7%濃度的固定濃度膠，并有10孔和15孔兩種孔數(shù)選擇。如果有較大量的特殊濃度需求，可提供定制服務(wù)。每種預(yù)制膠的最佳分離范圍請參考下表：
產(chǎn)品編號
預(yù)制膠濃度
孔數(shù)
最大上樣量
電泳緩沖液體系
轉(zhuǎn)膜緩沖液體系
最佳分離范圍
JP010535/JP010536
7%
10/15
60/30μl
Tris-Acetate SDS or Tris-Glycine
Tris-Glycine
40-500kD
JP010538/JP010539
3-8%
10/15
60/30μl
Tris-Acetate SDS or Tris-Glycine
Tris-Glycine
40-500kD
本預(yù)制膠含有1.5厘米高的4%濃縮膠，可以有效確保獲得非常銳利的條帶。
本預(yù)制膠丙烯酰胺(Acrylamide)與甲叉丙烯酰胺(Bisacrylamide)的比例為29:1，凝膠厚度為1.5mm。加樣孔數(shù)為10孔的最大上樣量為60μl，加樣孔數(shù)為15孔的最大上樣量為30μl。膠板尺寸：寬×高×厚度為98×84×4.1mm；凝膠尺寸：寬×高×厚度為81×74×1.5mm。
聚丙烯酰胺凝膠電泳(Polyacrylamide gel electrophoresis, PAGE)技術(shù)廣泛用于蛋白質(zhì)、核酸及蛋白質(zhì)-核酸復(fù)合物的分離純化、檢測、鑒定、分子量分析等實驗，是生命科學(xué)研究中最基本的實驗技術(shù)之一。常見的Western印跡(Western blot)檢測就是基于PAGE的。Glycine-SDS-PAGE (也被稱為Laemmli-SDS-PAGE，基于Tris-Glycine緩沖系統(tǒng))和Tricine-SDS-PAGE (基于Tris-Tricine緩沖系統(tǒng))是廣泛應(yīng)用的將蛋白質(zhì)按照分子量大小分離的方法[1]。Tricine-SDS-PAGE可以很好地分離小于30kDa的蛋白質(zhì)，而Glycine-SDS-PAGE被建議用于大于30kDa的蛋白。不同體系分離蛋白質(zhì)的特性與Glycine和Tricine的pKa值有關(guān)，不同大小的蛋白質(zhì)在不同的緩沖體系中擁有不同的電泳遷移率，且特定范圍內(nèi)的蛋白質(zhì)分辨率較高。因此，如果需要分離大分子量蛋白，就需要選擇合適的電泳系統(tǒng)[2]。同時，也建議使用由下至上丙烯酰胺濃度降低的梯度膠[3]。目前研究中常用Tris-Acetate凝膠系統(tǒng)分離大分子量蛋白。在Tris-Acetate凝膠系統(tǒng)中，Acetate(-)來自凝膠緩沖液，相較于系統(tǒng)中其它的陰離子，Acetate(-)對陽極具有極高的親和力，因此可作為前導(dǎo)離子(Leading ion)。凝膠緩沖液中含有Tris(+)和Acetate(-)，pH為7.0，使凝膠具有很高的分辨率。電泳緩沖液中含Tris(+)、Tricine(-)和十二烷基硫酸鹽(Dodecylsulfate, DS)，其中Tricine(-)作為尾隨離子(Tailing ion)。電泳緩沖液pH為8.24，減少了蛋白修飾，使條帶更銳利。對高分子量蛋白進行分離的結(jié)果也表明，Tris-Acetate凝膠分離效果好、轉(zhuǎn)移效率高、靈敏度高、分辨率佳。此外，Tris-Acetate凝膠也被報道可以作為一種穩(wěn)定的、經(jīng)濟高效的研究蛋白質(zhì)寡聚化的工具，僅使用單一凝膠即可提供出色的蛋白質(zhì)寡聚化結(jié)果[4]。
的BeyoGel?大分子量蛋白預(yù)制膠(Tris-Acetate)使用中性pH的Tris-Acetate緩沖液制備，不含SDS，既可用于變性蛋白電泳，也可用于非變性蛋白電泳。
推薦使用專門為本預(yù)制膠研制的配套電泳液，或參考使用說明自行配制相應(yīng)的電泳液。對于變性蛋白電泳，推薦使用BeyoGel? Tris-Acetate SDS Running Buffer (20X) (JP010749)；對于非變性蛋白電泳，推薦使用非變性PAGE電泳液(Tris-Gly, Powder) (JP010014F/JP010014G)。
本預(yù)制膠電泳后可以使用Tris-Glycine緩沖系統(tǒng)的轉(zhuǎn)膜液進行轉(zhuǎn)膜，但需降低轉(zhuǎn)膜液中乙醇或甲醇濃度(至5%)，推薦使用Western轉(zhuǎn)膜液(JP010021A或JP010021B)。
關(guān)于10孔和15孔預(yù)制膠的選擇：需要檢測的樣品數(shù)量多或者需要定量時，推薦使用15孔預(yù)制膠，通量更大、更便于進行較多樣品的定量統(tǒng)計分析；需要獲得非常漂亮的代表性圖片時，推薦使用10孔預(yù)制膠，10孔預(yù)制膠獲得的條帶更加平整和銳利。
本產(chǎn)品使用安全、便捷。本預(yù)制膠無需配制，即開即用，去掉梳子即可上樣，而傳統(tǒng)的PAGE配制凝膠繁瑣費時，并且制膠時還會接觸有毒和刺激性試劑。
本產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定。本預(yù)制膠采用高品質(zhì)玻璃膠板，和塑料膠板相比，大大減少了膠板對蛋白的吸附，電泳效果更好。本產(chǎn)品流水線灌注，品質(zhì)穩(wěn)定可靠，重復(fù)性好，不同批次的產(chǎn)品一致性高。
本產(chǎn)品電泳效果好。本預(yù)制膠的蛋白質(zhì)分離效果極佳，蛋白條帶平整、清晰、細膩、銳利，轉(zhuǎn)膜效率高。
本產(chǎn)品電泳槽兼容性好。本預(yù)制膠兼容市場上主流的小型電泳槽，如的MiniProGel?蛋白制膠與電泳系統(tǒng)(E6001/E6005)、Bio-Rad公司的Mini-PROTEAN? Tetra Cell電泳槽、Life公司的XCell SureLock Mini-Cell電泳槽(需與可免費提供的特制擋板配合使用)、以及上海天能、北京六一等的mini膠電泳槽或其它膠板寬度在10厘米的電泳槽。
本產(chǎn)品電泳時間短。本預(yù)制膠推薦的變性電泳電壓和電泳時間為150V 50-70分鐘；非變性電泳電壓和電泳時間為150V 90-180分鐘。完成電泳后可獲得非常平整和銳利的電泳條帶。具體的電泳時間可以根據(jù)溴酚藍的電泳位置或?qū)嶒灥木唧w需求進行確定。
本產(chǎn)品取出凝膠極為便捷。只需用刀片在玻璃膠板一側(cè)輕輕劃一下即可，并且玻璃膠板打開極為方便，無需特殊的起撬工具。
包裝清單：
產(chǎn)品編號
產(chǎn)品名稱
包裝
JP010539S
BeyoGel大分子量蛋白預(yù)制膠(Tris-Acetate, 3-8%, 15孔)
10塊
保存條件：
4℃保存，1-2個月有效。切勿置于0℃以下冷凍。
注意事項：
由于本預(yù)制膠保質(zhì)期較短，需新鮮制備，在您確認訂購后約3-5個工作日才能發(fā)貨。
本預(yù)制膠不能置于0℃以下冷凍，否則凝膠會凍裂。
內(nèi)槽電泳液和轉(zhuǎn)膜液建議新鮮配制，試劑純度不夠、反復(fù)使用或長期放置的緩沖液會降低電泳效果。
本預(yù)制膠為了兼容幾乎所有廠家的小型凝膠電泳槽，所以改進了與電泳槽U型硅橡膠密封條的吻合結(jié)構(gòu)(如、Bio-Rad等公司的電泳槽)。建議在電泳時須將具有突起結(jié)構(gòu)的U型硅橡膠密封條取出后反過來安裝，使其沒有突起的平滑面朝外，從而防止漏液，見下圖。一般內(nèi)槽電泳液加滿，外槽電泳液沒過電泳槽底部的陽極即可，并且電泳結(jié)束后的電泳緩沖液可以作為外槽緩沖液重復(fù)使用1-2次。另外，部分公司都已經(jīng)配套無突起結(jié)構(gòu)的U型硅橡膠密封條，使用這樣的U型硅橡膠密封條就不會出現(xiàn)內(nèi)外槽之間的漏液現(xiàn)象。
圖1. 、Bio-Rad等公司的電泳槽U型硅橡膠密封條的突起結(jié)構(gòu)圖。由于的BeyoGel? PAGE預(yù)制膠的該部位是平的，使其兼容幾乎所有廠家的小型膠電泳槽，所以電泳時須將具有突起結(jié)構(gòu)的硅橡膠密封條(左圖)取出后反過來安裝(右圖)，使其沒有突起的平滑面朝外，從而防止漏液。
由于的BeyoGel PAGE預(yù)制膠比Life公司的XCell SureLock Mini-Cell電泳槽配套的NuPAGE Gel或Novex? Mini Gel略薄，所以需加特制擋板配合使用。如有需要，請在訂購本產(chǎn)品時告知，會免費贈送該特制擋板。
電泳結(jié)束后可使用Tris-Glycine緩沖系統(tǒng)的轉(zhuǎn)膜液進行轉(zhuǎn)膜。乙醇或甲醇會使大分子蛋白很容易沉淀?？赏ㄟ^減少轉(zhuǎn)膜液中的乙醇或甲醇百分比(至5%)來避免這種情況發(fā)生。為了進一步確保蛋白質(zhì)不會沉淀，可添加SDS至終濃度為0.1%。SDS向蛋白添加均勻的負電荷，使得它們更容易從凝膠轉(zhuǎn)移到膜上。
轉(zhuǎn)膜時，推薦使用0.45μm的PVDF膜(FFP19/FFJP20/FFJP20)。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
