普通DNA產(chǎn)物純化試劑盒品牌：genefist | 貨號(hào)：GF204-03 
儲(chǔ)存條件
該試劑盒置于室溫（15-25℃）干燥條件下，可保存18個(gè)月，更長(zhǎng)時(shí)間的保存可置于2-8℃。2-8℃保存條件下，若溶液產(chǎn)生沉淀，使用前應(yīng)將試劑盒內(nèi)的溶液在室溫放置一段時(shí)間，必要時(shí)可在37℃水浴中預(yù)熱10 min，以溶解沉淀。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
本試劑盒采用獨(dú)特的離心吸附柱純化酶切、PCR等反應(yīng)溶液中的DNA片段，同時(shí)除去蛋白質(zhì)、其它有機(jī)化合物、無(wú)機(jī)鹽離子及寡核苷酸引物等雜質(zhì)，回收100 bp-20 kb DNA片段，回收率可達(dá)80%以上。每個(gè)離心吸附柱每次可吸附的DNA量為10 μg。使用本試劑盒回收的DNA可適用于各種常規(guī)操作，包括酶切、PCR、測(cè)序、文庫(kù)篩選、連接和轉(zhuǎn)化等實(shí)驗(yàn)。
如果回收前DNA量為1-5ug，建議選用GF203超薄DNA產(chǎn)物純化kit，推薦洗脫液體積20-50ul。
產(chǎn)品特點(diǎn)
快速：整個(gè)操作過(guò)程只需十幾分鐘，節(jié)省時(shí)間。
多樣：可以回收單鏈、雙鏈DNA片段以及環(huán)狀質(zhì)粒DNA。
高效：獨(dú)特的離心柱和精心配制的緩沖液，可大量回收到高純度目的DNA。
注意事項(xiàng)
1.本試劑盒適用于無(wú)選擇性的回收溶液中所有 DNA 片段，如需選擇性回收特定片段，同時(shí)去除其他不同大小片段，請(qǐng)選擇膠回收試劑盒。
2.回收率與初始 DNA 量和洗脫體積有關(guān)，初始量越少、洗脫體積越少，回收率越低。
3.對(duì)于<100 bp 和>10 kb 的 DNA 片段可以適當(dāng)?shù)脑黾游胶拖疵摰臅r(shí)間。
操作步驟
使用前請(qǐng)先在漂洗液PW中加入無(wú)水乙醇，加入體積請(qǐng)參照瓶上的標(biāo)簽；所有離心步驟均為使用臺(tái)式離心機(jī)在室溫下離心。
1.完成 PCR 擴(kuò)增或其他酶切反應(yīng)操作后，移取反應(yīng)混合液（含有預(yù)純化的 DNA）至干凈的離心管。
2.加入 3 倍體積的溶液 PB 至反應(yīng)混合液中（如 50ul 反應(yīng)混合液加入 150ul 的結(jié)合液）,震蕩混合均勻。
3.將吸附柱放入收集管中，移取上一步混合液至吸附柱，室溫放置 2 min，以 12,000 rpm(~13,400×g )離心 1 分鐘，丟棄收集管中的懸液，將吸附柱 CB2 放回收集管中。
注意：若樣本體積超過(guò) 700ul，可分次加入并重復(fù)此步驟。
4.向吸附柱 CB2 加入 700ul 的漂洗液，靜置 1 分鐘以平衡管柱膜，于 12,000 rpm(~13,400×g )離心 1 分鐘，丟棄懸液，將吸附柱 CB2 放回收集管中。
5.重復(fù)操作步驟 4。
6.將吸附柱 CB2 放回收集管中，12,000 rpm(~13,400×g )離心 2 分鐘，將吸附柱開(kāi)蓋置于室溫放置數(shù)分鐘，以去除、晾干殘余的漂洗液。
注意：漂洗液中乙醇的殘留會(huì)影響后續(xù)的酶反應(yīng)（酶切、PCR 等）實(shí)驗(yàn)。
7.將吸附柱CB2置于一個(gè)干凈離心管中，向吸附膜中間位置懸空滴加30-100洗脫緩沖液TB，室溫放置2 min。12,000 rpm (~13,400×g )離心 2 min 收集 DNA 溶液。
注意：洗脫體積不應(yīng)小于 30 μl。洗脫液的 pH 值對(duì)于洗脫效率有較大影響，若后續(xù)做測(cè)序，需使用 ddH2O做洗脫液，并保證其 pH 值在 7.0-8.5 范圍內(nèi)，pH 值低于 7.0 會(huì)降低洗脫效率；為了提高 DNA 的回收量，可將離心得到的溶液重新加回離心吸附柱中，室溫放置 2 min，12,000 rpm(~13,400×g)離心 2 min，將 DNA溶液收集到離心管。
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