普通瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒品牌：genefist | 貨號：GF209-03 
儲存條件
該試劑盒置于室溫（15-25℃）干燥條件下，可保存18個月，更長時間的保存可置于2-8℃。2-8℃保存條件下，若溶液產(chǎn)生沉淀，使用前應(yīng)將試劑盒內(nèi)的溶液在室溫放置一段時間，必要時可在37℃水浴中預(yù)熱10 min，以溶解沉淀。
產(chǎn)品簡介
本試劑盒采用可以高效、專一結(jié)合DNA的硅基質(zhì)材料和獨特的緩沖液系統(tǒng)，從TAE或TBE瓊脂糖凝膠上回收DNA片段，同時除去蛋白質(zhì)、其它有機化合物、無機鹽離子及寡核苷酸引物等雜質(zhì)?？苫厥?00 bp-30kb大小的片段，回收率可達80%以上。每個離心吸附柱每次可吸附的DNA量為10 μg。使用本試劑盒回收的 DNA 可適用于各種常規(guī)操作，包括酶切、PCR、測序、文庫篩選、連接和轉(zhuǎn)化等實
驗。如果回收前 DNA 量為 1-5ug，建議選用 DF208 超薄瓊脂糖凝膠回收 kit，推薦洗脫液體積 20-50ul。
產(chǎn)品特點
快速：整個操作過程快速方便，幾十分鐘即可完成回收工作。
多樣：可以回收單鏈、雙鏈DNA片段以及環(huán)狀質(zhì)粒DNA。
高效：獨特的離心柱和精心配制的緩沖液，可大量回收到高純度的目的DNA。
注意事項
1.電泳時應(yīng)使用新的電泳緩沖液，以免影響電泳和回收效果。
2.如下一步實驗要求較高，則應(yīng)盡量使用 TAE 電泳緩沖液。
3.切膠時，紫外照射時間應(yīng)盡量短，以免對 DNA 造成損傷。
4.回收率與初始 DNA 量和洗脫體積有關(guān)，初始量越少、洗脫體積越少，回收率越低。
5.對于<100 bp 和>10 kb 的 DNA 片段可以適當(dāng)?shù)脑黾游胶拖疵摰臅r間。
操作步驟
使用前請先在漂洗液PW中加入無水乙醇，加入體積請參照瓶上的標(biāo)簽。所有離心步驟均為使用臺式離心機在室溫下離心。
1.完成電泳后，將單一的目的 DNA 條帶從瓊脂糖凝膠中切下（盡量切除多余部分）放入干凈的離心管中，稱取重量（如果凝膠重為 0.1 g，其體積可視為 100 μl）。
2.向膠塊中加入 2 倍體積（如果瓊脂糖凝膠濃度＞2%，則加入 3 倍體積）的溶液 PN，60℃水浴孵育 5-15 min或更久，其間不斷溫和地上下翻轉(zhuǎn)離心管，直至膠塊充分溶解（若膠塊的體積過大，可事先將膠塊切成碎
塊）。
注意：膠塊完全溶解后將膠溶液溫度降至室溫再上柱，因為吸附柱在室溫時結(jié)合 DNA 的能力較強。
3.將吸附柱 CB2 放入收集管中，移取上一步溶膠液至吸附柱，室溫放置 2 min，以 12,000 rpm(~13,400×g )離心 1 分鐘，丟棄收集管中的濾液，將吸附柱 CB2 放回收集管中。
注意：若樣本體積超過 700ul，可分次加入并重復(fù)此步驟。
4.可選步驟：向吸附柱 CB2 加入 400ul 的溶液 PN，以 12,000 rpm(~13,400×g )離心 1 分鐘，丟棄收集管中的濾液，將吸附柱 CB2 放回收集管中（此步驟可去除殘余的瓊脂糖凝膠，以避免純化的 DNA 進行酶切反應(yīng)時出現(xiàn)抑制現(xiàn)象）。
5.向吸附柱 CB2 加入 700ul 的漂洗液，靜置 1 分鐘以平衡管柱膜，于 12,000 rpm(~13,400×g )離心 1 分鐘，丟棄濾液，將吸附柱 CB2 放回收集管中。
6.重復(fù)操作步驟 5。
7.將吸附柱 CB2 放回收集管中，12,000 rpm(~13,400×g )離心 2 分鐘，將吸附柱開蓋置于室溫放置數(shù)分鐘，以去除、晾干殘余的漂洗液。
注意：漂洗液中乙醇的殘留會影響后續(xù)的酶反應(yīng)（酶切、PCR 等）實驗。
8.將吸附柱 CB2 置于一個干凈離心管中，向吸附膜中間位置懸空滴加 30-100ul 洗脫緩沖液 TB，室溫放置 2min。12,000 rpm (~13,400×g )離心 2 min 收集 DNA 溶液。
注意：洗脫體積不應(yīng)小于 30 μl，體積過少影響回收效率。洗脫液的 pH 值對于洗脫效率有較大影響，若后續(xù)做測序，需使用 ddH2O 做洗脫液，并保證其 pH 值在 7.0-8.5 范圍內(nèi)，pH 值低于 7.0 會降低洗脫效率；且 DNA 產(chǎn)物應(yīng)保存在-20°C，以防 DNA 降解。為了提高 DNA 的回收量，可將離心得到的溶液重新加回離心吸附柱中，室溫放置 2 min，12,000 rpm(~13,400×g)離心 2 min，將 DNA 溶液收集到離心管。
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