多糖多酚植物基因組DNA提取試劑盒品牌：genefist | 貨號(hào)：GF360 
儲(chǔ)存條件
該試劑盒置于室溫（15-25℃）干燥條件下，可保存18個(gè)月，更長(zhǎng)時(shí)間的保存可置于2-8℃。2-8℃保 存條件下，若溶液產(chǎn)生沉淀，使用前應(yīng)將試劑盒內(nèi)的溶液在室溫放置一段時(shí)間，必要時(shí)可在37℃水浴中預(yù) 熱10 min，以溶解沉淀。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介及特點(diǎn)
本試劑盒采用特異性結(jié)合 DNA 的離心吸附柱和獨(dú)特的緩沖系統(tǒng)，能從多種植物組織中分離純化高質(zhì)量 基因組 DNA，獨(dú)特的沉淀溶液可以沉淀去除多糖多酚植物樣本中的蛋白質(zhì)、多糖以及酚類等雜質(zhì)。提取的基 因組 DNA 純度高，質(zhì)量穩(wěn)定可靠。 使用本試劑盒純化的基因組 DNA 適用于各種常規(guī)操作，包括酶切、PCR、文庫構(gòu)建、Southern 雜交、芯 片檢測(cè)、高通量測(cè)序等實(shí)驗(yàn)。
簡(jiǎn)便快捷：1 h內(nèi)即可獲得高純度的基因組DNA。
適用廣泛：適用于多種植物組織，尤其是多糖多酚植物。
安全無毒：無需酚/氯仿等有毒有機(jī)試劑。
超純高效：高效獲得高純度的DNA，可直接用于PCR、酶切、雜交等分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。
注意事項(xiàng)
1.樣品應(yīng)避免反復(fù)凍融，否則會(huì)導(dǎo)致提取的 DNA 片段較小且提取量也下降。 2.若溶液 GS1 或溶液 PBC 中有沉淀，可在 37℃水浴中重新溶解，搖勻后使用。
事前準(zhǔn)備：
1.溶液 GS2 制備：加入 2ml 無菌水到 0.46g 溶液 GS2 濃縮液粉末中,旋渦 1 分鐘，50℃孵育至完全溶解，得 溶液 GS2。制備好的溶液 GS2 長(zhǎng)期保存需要儲(chǔ)存在 4℃。
2.向溶液 PBC 中加入 30ml 無水乙醇，混勻，室溫保存。
3.向漂洗液 PW 中加入 64ml 無水乙醇，混勻，室溫保存。
4.在研磨組織之前解凍溶液 GS2;將水浴或金屬浴預(yù)熱至 65℃。
操作步驟
使用前請(qǐng)先在溶液PBC和漂洗液PW中加入無水乙醇，加入體積請(qǐng)參照瓶上的標(biāo)簽。
1.取植物新鮮組織約 100 mg 或干重組織約 30 mg，加入液氮充分碾磨。
注意：使用超過推薦量的樣品可能堵塞吸附柱，降低回收率和質(zhì)量。
2.立即將研磨好的粉末迅速轉(zhuǎn)移至 1.5 ml 微量離心管中，并添加 360μ 溶液 GS1、40μl 制備好的溶液 GS2 和 25μl RNaseA 溶液，迅速渦旋混勻。
注意：不要預(yù)先混合這些溶液。
注意：為了獲得最佳產(chǎn)量，徹底研磨組織，不充分研磨的組織中的 DNA 可能無法被試劑接觸到;為了得到 完整的 DNA，新鮮組織應(yīng)在液氮中迅速冷凍并存儲(chǔ)在-80℃中。
3.將離心管放在 65℃水浴 20 min，水浴過程中顛倒離心管以混合樣品數(shù)次。
4.加入 130 μl 溶液 PGP，渦旋振蕩 1 min，混勻后將離心管置于冰上靜置 5min，然后 12,000 rpm (~13,400×g ) 離心 5 min。
5.轉(zhuǎn)移上清至過濾柱 CS1 中（過濾柱 CS1 放在收集管中），12,000 rpm (~13,400×g)離心 1 min ，轉(zhuǎn)移濾 液至新的離心管中。
6.向?yàn)V液中加入 1.5 倍體積的“溶液 PBC（已添加無水乙醇）”，充分混勻，此時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀沉淀，但不 影響后續(xù) DNA 的純化。 例如：對(duì)于 500ul 濾液，加入 750ul 溶液 PBC（已添加無水乙醇）
7.將上一步所得溶液和絮狀沉淀“分次”轉(zhuǎn)移到吸附柱 CG1 中（吸附柱 CG1 放在收集管中），12,000 rpm (~13,400×g ) 離心 1 min，倒掉廢液，將吸附柱 CG1 放入收集管中。
8.向吸附柱 CG1 中加入 700μl 漂洗液 PW（使用前請(qǐng)先檢查是否已加入無水乙醇），12,000 rpm (~13,400× g)離心 1 min，丟棄廢液，將吸附柱 CG1 放入收集管中。
9.重復(fù)操作步驟 8。
10.將吸附柱 CG1 放回收集管中，12,000 rpm (~13,400×g)離心 2 min，棄收集管，然后將吸附柱 CG1 轉(zhuǎn)移 到新的離心管中，室溫晾干 5-10 min。
注意：乙醇?xì)埩魰?huì)抑制后續(xù)的酶反應(yīng)，所以晾干時(shí)要確保乙醇揮發(fā)干凈，但也不要干燥太長(zhǎng)時(shí)間，以免 難以洗脫 DNA。
11.在吸附柱 CG1 中加入 50-200μl 洗脫緩沖液 TB，室溫放置 3-5 min，12,000rpm(~13,400×g)離心 2 min， 將溶液收集到離心管中。
注意：洗脫緩沖液體積不應(yīng)少于 50μl，體積過小影響回收效率。洗脫液的 pH 值對(duì)于洗脫效率有很大影 響。若用 ddH2O 做洗脫液應(yīng)保證其 pH 值在 7.0-8.5 范圍內(nèi)，pH 值低于 7.0 會(huì)降低洗脫效率；且 DNA 產(chǎn)物 應(yīng)保存在-20℃，以防 DNA 降解。
為增加基因組 DNA 的得率，可將離心得到的溶液再加入吸附柱 CG1 中， 室溫放置 2 min，12,000 rpm (~13,400×g )離心 2 min。
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