屬性
質(zhì)量水平
200
形式
liquid
儲(chǔ)存條件
protect from light
濃度
1mg/mL
technique(s)
transfection: suitable
熒光
λex340nm; λem488nm (nur DAPI)
λex364nm; λem454nm (DAPI-DNA-Komplex)
運(yùn)輸
dry ice
儲(chǔ)存溫度
20°C
SMILES string
Cl.Cl.NC(=N)c1ccc(cc1)-c2cc3ccc(cc3[nH]2)C(N)=N
InChI
1S/C16H15N5.2ClH/c17-15(18)10-3-1-9(2-4-10)13-7-11-5-6-12(16(19)20)8-14(11)21-13;;/h1-8,21H,(H3,17,18)(H3,19,20);2*1H
InChI key
FPNZBYLXNYPRLR-UHFFFAOYSA-N
說(shuō)明
一般描述
DAPI,4′,6-二氨基-2-苯基吲哚,是一種藍(lán)色熒光核酸染色劑,在選擇性結(jié)合雙鏈DNA的小溝時(shí)會(huì)發(fā)出明亮的熒光。它對(duì)DNA的選擇性和高細(xì)胞通透性使得對(duì)細(xì)胞核的染色幾乎沒(méi)有胞質(zhì)背景干擾。DAPI-DNA復(fù)合物的激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)分別為360 nm和460 nm。
應(yīng)用
在瓊脂糖凝膠中染色DNA,DAPI比溴化乙錠敏感幾倍。它可用于DNA的光足跡圖譜,通過(guò)對(duì)雙鏈復(fù)合體的特殊可視化檢測(cè)印跡應(yīng)用中的退火探針,并使用流式細(xì)胞分析術(shù)研究DNA中的變化并分析凋亡過(guò)程中的DNA含量。DAPI染色也是一種敏感和特異的支原體檢測(cè)方法。
提供預(yù)制DAPI溶液,濃度為1mg/mL建議用所需的緩沖液以1:1000的比例稀釋預(yù)制DAPI溶液,制備1 μg/mL的工作濃度(大多數(shù)應(yīng)用中使用的典型工作濃度為0.1 μg/mL-10 μg/mL)。將DAPI溶液(1 mg/mL)避光儲(chǔ)存于-20°C。建議分裝預(yù)制DAPI溶液,并避免反復(fù)凍融。
在瓊脂糖凝膠中染色DNA,DAPI比溴化乙錠敏感幾倍。它可用于DNA的光足跡圖譜,通過(guò)對(duì)雙鏈復(fù)合體的特殊可視化檢測(cè)印跡應(yīng)用中的退火探針,并使用流式細(xì)胞分析術(shù)研究DNA中的變化并分析凋亡過(guò)程中的DNA含量。DAPI染色也是一種敏感和特異的支原體檢測(cè)方法。
用于免疫熒光顯微鏡、高含量篩選(HCS)、染色體染色和流式細(xì)胞術(shù)(FACS)中的核復(fù)染色
生化/生理作用
DNA的細(xì)胞滲透性熒光小溝結(jié)合探針。與雙鏈DNA的小溝(富含AT的DNA優(yōu)先)結(jié)合,形成穩(wěn)定的復(fù)合物,其發(fā)出的熒光比單獨(dú)的DAPI高約20倍。
特點(diǎn)和優(yōu)勢(shì)
即用型液體,細(xì)胞可滲透染料。
可與活細(xì)胞和固定細(xì)胞一起使用。
對(duì)固定細(xì)胞染色和DNA含量定量有效。
在熒光顯微鏡或高含量篩選(HCS)應(yīng)用中使用熒光抗體時(shí),可獲得最佳復(fù)染效果。
外形
提供預(yù)制DAPI溶液,水中濃度為1mg/mL