屬性
質(zhì)量水平
200
生物來源
bovine pancreas
形式
essentially salt-free, lyophilized powder
specific activity
≥10,000BAEE units/mg protein
分子量
23.8kDa
溶解性
hydrochloric acid: soluble 1mM
application(s)
diagnostic assay manufacturing
異質(zhì)活性
Chymotrypsin ≤0.1 BTEE units/mg protein
儲(chǔ)存溫度
20°C
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說明
應(yīng)用
對(duì)于胰蛋白酶消化肽，胰蛋白酶：肽 使用約為 1：100 至 1:20 的比例。從培養(yǎng)表面除去粘附細(xì)胞是本產(chǎn)品的一個(gè)典型應(yīng)用。 從其底物中去除細(xì)胞所需的胰蛋白酶濃度主要取決于細(xì)胞類型和培養(yǎng)物的年齡。 胰蛋白酶也被用于細(xì)胞培養(yǎng)期間細(xì)胞的再懸浮、蛋白質(zhì)組學(xué)研究中的蛋白質(zhì)消化和各種凝膠內(nèi)消化。 其他應(yīng)用包括：通過基于膜的技術(shù)評(píng)估結(jié)晶，用在確定動(dòng)力學(xué)陷阱的存在會(huì)限制蛋白質(zhì)的折疊速率和產(chǎn)量的一項(xiàng)研究中。
包裝
50, 100, 250, 500 mg in glass bottle
1, 5, 100 g in glass bottle
生化/生理作用
胰蛋白酶切割賴氨酸和精氨酸殘基的 C 端肽。 如果酸性殘基位于切割位點(diǎn)的任一側(cè)，則該反應(yīng)的水解速度減慢，并且如果脯氨酸殘基位于切割位點(diǎn)的羧基側(cè)，則停止水解。 胰蛋白酶活性的最適 pH 為 7-9。 胰蛋白酶還可以起到裂解氨基酸合成衍生物的酯和酰胺鍵的作用。 將 EDTA 作為螯合劑添加到胰蛋白酶溶液中，用于中和鈣離子和鎂離子，這些離子遮蔽胰蛋白酶作用的肽鍵。 去除這些離子會(huì)增加酶活性。
絲氨酸蛋白酶抑制劑，包括 DFP、TLCK、APMSF、AEBSEF 和抑肽酶等，將抑制胰蛋白酶。
組分
胰蛋白酶是由223個(gè)氨基酸殘基的單鏈多肽所組成，通過從胰蛋白酶原在Lys – lle肽鍵處被切割去除N末端六肽而產(chǎn)生。 氨基酸的序列是由6個(gè)二硫橋所交聯(lián)而成的。 這是胰蛋白酶、β-胰蛋白酶的天然形式。 β-胰蛋白酶可發(fā)生自溶，并在Lys – Ser殘基處切割以產(chǎn)生α-胰蛋白酶。 胰蛋白酶是絲氨酸蛋白酶家族的一員。
注意
在1 mM HCl中的溶液經(jīng)分裝并儲(chǔ)存在-20°C可穩(wěn)定1年。Ca2+的存在將也會(huì)消除胰蛋白酶的自溶并維持其在溶液中的穩(wěn)定性。 胰蛋白酶在2.0 M尿素、2.0 M鹽酸胍或0.1% (w/v) SDS中可維持其絕大多數(shù)的活性。
單位定義
使用 BAEE 作為底物，一個(gè) BAEE 單元，將在 pH 7.6，25℃ 下，每分鐘產(chǎn)生 0.001 的 A253。
制備說明
可以1 mg/mL溶于1 mM HCl。
它還經(jīng)TPCK處理并透析。 用L-1-甲苯磺酰胺-2-苯乙基氯甲基酮（TPCK）處理可降低通常存在于胰蛋白酶中的胰凝乳蛋白酶活性。