從植物細(xì)胞、組織或真菌細(xì)胞樣本中分離總DNA,產(chǎn)量可達(dá)30μg
上海金畔生物科技有限公司提供凱杰Qiagen 植物基因組DNA小提試劑盒 DNeasy Plant Mini Kit (50) 69104,品質(zhì)保證,價(jià)格優(yōu)惠,全國(guó)聯(lián)保,歡迎咨詢。
高純度DNA,無(wú)污染物和酶抑制劑
快速純化得到即用型DNA
無(wú)需有機(jī)抽提,無(wú)需乙醇沉淀
DNeasy Plant Mini Kit通過(guò)基于硅膠膜的離心柱形式,可快速便捷的純化DNA。常規(guī)產(chǎn)量為3–30 μg高品質(zhì)DNA,產(chǎn)量取決于樣本來(lái)源。DNeasy Plant Mini Kit的DNA純化過(guò)程可在QIAcube全自動(dòng)核酸純化儀上自動(dòng)化進(jìn)行。
Performance
DNeasy Plant Maxi Kit可快速高效的純化高品質(zhì)DNA,可以從不同種類的植物和組織樣本中進(jìn)行純化,包括較難處理的樣本來(lái)源(參見(jiàn)下表)。樣本可以是新鮮、冷凍或者風(fēng)干的。優(yōu)化的DNeasy Plant操作流程與QIAshredder Maxi離心柱結(jié)合使用,獨(dú)特的過(guò)濾和勻質(zhì)柱,能夠有效的去除細(xì)胞碎片并且優(yōu)化裂解后的樣本處理流程。
用DNeasy Kits處理的植物種類簡(jiǎn)表
Abies alba(銀杉) | Nicotiana tabacum(煙草) |
Aesculus hippocastanum(七葉樹) | Oryza sativa(水稻)4 |
Arabidopsis thaliana(擬南芥) | Pelargonium sp.(天竺葵)4 |
Avena sp.(燕麥) | Petunia sp.4 |
Brassica napus(油菜) | Pinus sylvestris(歐洲赤松),P. brutia5 |
Brassica oleracea(大頭菜) | Populus tremula(白楊) |
Chicorium endivia(菊苣) | Pseudotsuga menziesii(Douglas 冷杉) |
Citrullini lanatus(西瓜) | Quercus robur, Q. petrea(橡樹)6,7 |
Egeria sp. | Rhododendron sp.2,4 |
Fagus sylvatica(櫸木)1 | Rubus idaeus(覆盆子) |
Helianthus spp.(向日葵) | Solanum tuberosum(土豆) |
Hordeum vulgare(大麥)2 | Sphagnum palustre(苔) |
Humulus sp.(酒花) | Spinacia oleracea(菠菜) |
Hydrilla sp. | Taxus baccata(紅豆杉) |
Kalanchoe spp. | Triticum aestivum(小麥)4 |
Lupinus sp. | Ulmus glabra(榆樹)6 |
Lycopersicon esculentum(番茄)3 | Vitis spp.(葡萄)6 |
Myriophyllum sp. | Zea mays(玉米) |
幼葉或針葉(以及其他組織,如上)收集并立即速凍。使用DNeasy Plant Mini Kit進(jìn)行DNA提取。1山毛櫸、2干葉、3愈傷組織、4年植物上的葉子、5胚乳、6富含碳水化合物的老樹葉、7芽。包括真菌在內(nèi)的其他物種的DNA提取的詳細(xì)信息,請(qǐng)聯(lián)系QIAGEN公司的技術(shù)支持或當(dāng)?shù)氐慕?jīng)銷商。
常規(guī)產(chǎn)量為3–30 μg,樣本量達(dá)100 mg濕重,洗脫體積為50–400 μl。DNA產(chǎn)量因種類和組織的不同而不同,取決于基因組大小、倍體、細(xì)胞數(shù)量和組織樣本的年齡。較低和較高的范圍值分別對(duì)應(yīng)擬南芥和小麥。
DNeasy Plant操作流程制備純核酸,無(wú)多糖和其他使用常規(guī)方法純化產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物。這些雜質(zhì)可能會(huì)干擾分光讀數(shù)并抑制酶反應(yīng)。DNeasy純化的DNA的吸光度掃描在260 nm處顯示對(duì)稱峰(參見(jiàn)”DNA purity from pine needles”),證明DNA無(wú)酶抑制劑等雜質(zhì)。DNeasy純化的DNA最長(zhǎng)為40 kb(參見(jiàn)”Pure DNA”)。純化的DNA可用于多種應(yīng)用(參見(jiàn)”PCR analysis”和”RAPD analysis”)。
Principle
DNeasy Plant Kits使用先進(jìn)的硅膠膜技術(shù)和簡(jiǎn)單的離心操作流程從植物組織和細(xì)胞或者真菌中提取高純度的細(xì)胞總DNA。DNeasy技術(shù)取代繁瑣的DNA提取操作流程,如十六烷基三甲基溴化銨(CTAB)、苯酚或者氯仿萃取。使用DNeasy操作流程不需要乙醇沉淀,純化的DNA可以直接使用。DNeasy樣本制備技術(shù)已經(jīng)過(guò)認(rèn)證。
Procedure
首先對(duì)樣本進(jìn)行機(jī)械攪拌,然后進(jìn)行化學(xué)裂解(參見(jiàn)”DNeasy Plant and DNeasy 96 Plant procedures”)。在裂解過(guò)程中,RNA被RNAase消化去除。細(xì)胞碎片、沉淀的蛋白質(zhì)和多糖都被去除,并且樣本通過(guò)QIAshredder Maxi離心柱并離心實(shí)現(xiàn)勻漿。調(diào)節(jié)緩沖溶液條件,并將裂解產(chǎn)物上樣到DNeasy Plant Maxi離心柱中。在短暫的離心過(guò)程中,DNA選擇性結(jié)合到硅膠膜上,污染物通過(guò)。余下的污染物和酶抑制劑經(jīng)過(guò)一或者兩步高效的洗滌步驟去除。然后,用水或者低鹽緩沖溶液將純化的DNA洗脫,待用。
Applications
DNeasy Plant Mini Kit適用于從植物組織中純化DNA,包括:
植物細(xì)胞
植物組織
真菌
Features | Specifications |
應(yīng)用 | PCR, real-time PCR, blotting |
洗脫體積 | 50–400 μl |
規(guī)格 | Spin column |
主要樣本類型 | Plant samples |
處理 | Manual |
純化總RNA、miRNA、poly A+ mRNA、DNA或蛋白 | DNA |
樣本量 | <100 mg |
技術(shù) | Silica technology |
每次運(yùn)行或制備時(shí)間 | <1 hour |
產(chǎn)量 | 3–30 μg |