SDT裂解液,常用生化試劑

SDT裂解液品牌:JinPan | 貨號:JP-8452-500ml

SDT Lysis Buffer

【保存條件】
4℃保存,有效期 6 個月。-20℃保存,有效期 1 年。
【概述】
SDT 裂解緩沖液用于裂解哺乳動物細(xì)胞和組織。其含有 SDS、Tris-HCl、DTT,對樣本全蛋白有很好的提取效果。 但其中所含的 SDS 會使蛋白質(zhì)變性失活,因此不適合后續(xù)活性相關(guān)實驗。試劑請于避光保存,以確保其穩(wěn)定性。
【使用建議】
1. 取 100mg 動物組織或細(xì)胞(組織提前剪成小塊)加入 500μl PBS 溶液中初步勻漿(60 Hz,45s),再加入 500μl SDT 裂解液。
2. 將上一步加有 SDT 裂解液的動物組織或細(xì)胞于 4℃進行勻漿(60 Hz,20s)。
3. 低速短暫離心將管壁液體離下,后置于沸水?。ɑ?100℃)3min。
4. 再次使用探頭超聲:40-50W 超聲 5s,間隔 5s,一共 6 個循環(huán)。
5. 將溶液置于沸水?。ɑ?100℃)2min,10000g 離心 10min。
6. 收集上清進行后續(xù)實驗。
【注意事項】
1. 為了您的安全與健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
2. 該試劑僅用于科研領(lǐng)域,不得用于臨床診斷或其他用途。
3. SDT 裂解液不適用于后續(xù)做與活性相關(guān)的實驗,如免疫共沉淀。在進行蛋白質(zhì)濃度測定時由于 SDT 裂解液中含有 SDS 和 DTT,因此 Bradford 法和 BCA 方法不適用,而應(yīng)選擇去垢劑和還原劑均兼容的熒光法測定蛋白質(zhì)濃度。各種裂解液中含有的去垢劑均會影響胰蛋白酶活性,并且對質(zhì)譜分析產(chǎn)生很大影響,因此均需要在蛋白質(zhì)樣品酶解前除去。
4. SDT 裂解液中含有較高濃度的 SDS,在低溫下可能析出為正?,F(xiàn)象,使用前只需將溶液置于 37℃加熱
5-10min 或至溶解即可。

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