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Human TNF-β ELISA Kit

發(fā)表于由

產(chǎn)品編號

PT903
Human TNF-β ELISA Kit
96次

3198

的Human TNF-β ELISA Kit (Human Tumor Necrosis Factor-β Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit)，即人腫瘤壞死因子β酶聯(lián)免疫吸附檢測試劑盒，是一種用于特異性地高靈敏地定量檢測人血清、血漿或細胞培養(yǎng)上清液中的TNF-β的ELISA試劑盒。
本產(chǎn)品檢測靈敏度高，特異性強，重復性好。多次重復檢測結果表明，最小檢出量為15.4pg/ml，與人GM-CSF、IL-8、IL-1β、 TNF-α，小鼠TNF-α等均沒有交叉反應，板內、板間變異系數(shù)均小于10%。
腫瘤壞死因子β?(Tumor?Necrosis?Factor-β,?TNF-β)，又稱淋巴毒素α?(Lymphotoxin-alpha,LT-α)，屬于TNF家族成員。人TNF-β分子量為22kDa，與小鼠和大鼠TNF-β具有73%的氨基酸同源性。分泌型TNF-β以同源三聚體形式存在，能夠激活受體TNF?RI/TNFRSF1A、TNF?RII/TNFRSF1B和HVEM/TNFRSF14。TNF-β還能夠與LT-β形成異質三聚體，激活受體LT-βR/TNFRSF3。TNF-β與受體結合后能夠對腫瘤細胞產(chǎn)生一定的細胞毒性作用，除此之外還能夠影響淋巴結的發(fā)育、調節(jié)淋巴結在炎癥反應和免疫過程當中的功能。TNF-β主要表達在活化的T淋巴細胞和B淋巴細胞上，對自身免疫性疾病具有一定的生物學效應。
??????本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法(Sandwich?ELISA)檢測樣品中人TNF-β的濃度，其原理見圖1。人TNF-β特異的單克隆捕獲抗體已預包被于酶標板上，當加入標準品或樣品時，其中的人TNF-β會與捕獲抗體結合。當加入生物素化的抗人TNF-β抗體后，生物素化抗人TNF-β抗體與人TNF-β結合，形成夾心的免疫復合物。隨后加入辣根過氧化物酶標記Streptavidin?(HRP-Streptavidin)，由于生物素與鏈霉親和素(Streptavidin)可以特異性地結合，因此鏈霉親和素連接的HRP就會與夾心的免疫復合物連接起來而被固相捕獲。最后加入顯色劑TMB溶液，固相捕獲的辣根過氧化物酶就會催化無色的顯色劑氧化成藍色物質，在加入終止液后呈黃色。通過酶標儀檢測450nm處的吸光度值就能實現(xiàn)定量檢測。人TNF-β濃度與A450值呈正比，通過繪制標準曲線，對照樣品吸光度值，即可計算出樣品中人TNF-β濃度。

圖1. 雙抗體夾心ELISA原理圖。

一個包裝的本試劑盒，包括標準品檢測，可以進行96次檢測。
包裝清單：

產(chǎn)品編號

產(chǎn)品名稱

包裝

PT903-1

人TNF-β抗體預包被板

8孔×12條

PT903-2

樣品分析緩沖液

5ml

PT903-3

標準品稀釋液

10ml

PT903-4

人TNF-β標準品

2-4瓶

PT903-5

人TNF-β生物素化抗體

10ml

PT903-6

辣根過氧化物酶標記Streptavidin

10ml

PT903-7

洗滌液(20X)

30ml

PT903-8

TMB溶液

10ml

PT903-9

終止液

5ml

PT903-10

封板膜(透明)

2張

PT903-11

封板膜(白色)

2張

–

說明書

1份

保存條件：
標準品4℃保存，1-2周內有效，-20℃保存6個月內有效；試劑盒其它組分4℃保存6個月內有效。除標準品外，試劑盒其它組分嚴禁凍存。
注意事項：
由于標準品一般是凍干粉，在制備后需要嚴格校準，所以標準品的瓶數(shù)及每瓶標準品所需加入的稀釋液體積請以實際收到的試劑盒及標準品標簽上的標注為準。
洗滌液(20X)在低溫下可能有結晶，如果發(fā)現(xiàn)有結晶，請室溫水浴加熱使結晶完全溶解后再配制工作液。
為保證標準品的精確性，標準品配制使用后，如果有剩余請勿再次使用。
TMB溶液請勿接觸氧化劑和金屬，否則容易失效。
加樣時，請注意每個樣品或標準品必須更換槍頭，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取體積的誤差。
由于本試劑盒均經(jīng)過獨立測試，所以請勿混用不同貨號和不同批次的試劑盒組分，即使是同種試劑盒不同批次的試劑盒組分也不能混用。多個試劑盒同時檢測時，請獨立使用各個試劑盒中的試劑，請勿使用不同試劑盒中相同名稱的組分。
充分混勻對保證反應結果的精準性很重要，在加液后請輕輕晃動整個96孔板，以保證混勻。
本試劑盒很多操作在室溫進行，要求嚴格控制室溫在25-28℃。溫度低于25℃會導致最終檢測到的吸光度顯著下降。
洗滌過程非常重要，洗滌不充分會使精確度下降并導致結果誤差較大。
檢測標準品和樣品時建議設置重復孔，以確保檢測結果的可信度。
加樣過程中須避免氣泡的產(chǎn)生。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內。
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

Human TNF-α ELISA Kit

發(fā)表于由

產(chǎn)品編號

PT518
Human TNF-α ELISA Kit
96次

2798

的Human TNF-α ELISA Kit (Human Tumor Necrosis Factor-α Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit)，即人腫瘤壞死因子-α酶聯(lián)免疫吸附檢測試劑盒，是一種用于特異性地高靈敏地定量檢測人血清、血漿、細胞或組織裂解液、或細胞培養(yǎng)上清液中的TNF-α的試劑盒。
本產(chǎn)品檢測靈敏度高，特異性強，重復性好。多次重復檢測結果表明，最小檢出量為14.3pg/ml，與人TNF-β、sTNF、小鼠TNF-α、RI sTNF、RII sTNF和大鼠TNF-α等均沒有交叉反應，板內、板間變異系數(shù)均小于10%。
TNF-α，即TNF、TNFα或TNFalpha，也稱cachectin、cachexin或TNFSF1A。TNF-α由巨噬細胞、上皮細胞等多種細胞在細菌感染、內毒素刺激、病毒或寄生蟲感染時產(chǎn)生。腫瘤壞死因子超家族(Tumor necrosis factor superfamily)共約19個成員，包含由巨噬細胞等產(chǎn)生的TNF-α和T淋巴細胞產(chǎn)生的TNF-β(也稱Lymphotoxin-alpha)，以及FASL、TRAIL、CD40L、CD27L、CJP070L等。TNF-α與TNF-β在結構上有一定的相似性，并且在氨基酸水平有28%的同源性，它們擁有共同的受體TNFR1和TNFR2。由于TNF-α的生物學活性占TNF總活性的70%~95%，因此目前常說的TNF多指TNF-α。TNF (Tumor Necrosis Factor)因為能誘導細胞死亡而得名，實際上其很多時候誘導的細胞死亡為細胞凋亡。人TNF-α有兩種形式，一種是由233個氨基酸組成的跨膜蛋白同源三聚體(homotrimers)，另外一種是該跨膜蛋白在TNF-α轉化酶TACE(TNF-α converting enzyme)的作用下切除信號肽，形成成熟的157個氨基酸的可溶性TNF-α單體(分子量為17KDa)的同源三聚體。無論TNF-α的跨膜同源三聚體還是可溶性同源三聚體(51kD)，都具有生物學活性，但活性的差異目前仍有爭議。小鼠和人的TNF-α有約79%的氨基酸同源性，也同樣形成同源三聚體發(fā)揮作用。TNF-α可以誘導產(chǎn)生炎癥反應、發(fā)燒(fever)、細胞凋亡、抑制腫瘤形成和病毒復制等。TNF-α也參與了包括哮喘、克羅恩氏病、類風濕性關節(jié)炎、神經(jīng)性疼痛、阿茲海默癥、肥胖癥、II型糖尿病、自身免疫病和腫瘤等疾病的發(fā)生發(fā)展。

圖1. TNF-α的信號通路示意圖

TNF-α被誘導分泌后，其同源三聚體與受體TNFR1(TNF receptor, type I)或TNFR2(TNF receptor, type II)結合而引發(fā)其下游信號通路的一系列反應。TNF-α的信號通路參見圖1。TNFR1在大多數(shù)組織中有表達，而TNFR2主要在免疫細胞中表達。TNF-α的跨膜同源三聚體和可溶性同源三聚體都可以完全激活TNFR1，而TNFR2僅對TNF-α的跨膜同源三聚體產(chǎn)生響應。
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法(Sandwich ELISA)檢測樣品中靶蛋白的的濃度，其原理見圖2。靶蛋白特異的單克隆捕獲抗體已預包被于酶標板上，當加入標準品或樣品時，其中的靶蛋白會與捕獲抗體結合。當加入生物素化的抗靶蛋白抗體后，生物素化抗靶蛋白抗體與靶蛋白結合，形成夾心的免疫復合物。隨后加入辣根過氧化物酶標記Streptavidin(HRP-Streptavidin)，由于生物素與鏈霉親和素(Streptavidin)可以特異性地結合，因此鏈霉親和素連接的HRP就會與夾心的免疫復合物連接起來而被固相捕獲。最后加入顯色劑TMB溶液，固相捕獲的辣根過氧化物酶就會催化無色的顯色劑氧化成藍色物質，在加入終止液后呈黃色。通過酶標儀檢測450nm處的吸光度值就能實現(xiàn)定量檢測。靶蛋白濃度與A450值呈正比，通過繪制標準曲線，對照樣品吸光度值，即可計算出樣品中靶蛋白濃度。

圖2. 雙抗體夾心ELISA原理圖。

一個包裝的本試劑盒，包括標準品檢測，可以進行96次檢測。
包裝清單：

產(chǎn)品編號

產(chǎn)品名稱

包裝

PT518-1

人TNF-α抗體預包被板

8孔×12條

PT518-2

樣品分析緩沖液

5ml

PT518-3

標準品稀釋液

10ml

PT518-4

人TNF-α標準品

2-4瓶

PT518-5

人TNF-α生物素化抗體

10ml

PT518-6

辣根過氧化物酶標記Streptavidin

10ml

PT518-7

洗滌液(20X)

30ml

PT518-8

TMB溶液

10ml

PT518-9

終止液

5ml

PT518-10

封板膜(透明)

2張

PT518-11

封板膜(白色)

2張

—

說明書

1份

保存條件：
除標準品外，4℃保存6個月內有效。標準品4℃保存，1-2周內有效，-20℃保存6個月內有效。注意TMB溶液避光保存。
注意事項：
由于標準品一般是凍干粉，在制備后需要嚴格校準，所以標準品的瓶數(shù)及每瓶標準品所需加入的稀釋液體積請以實際收到的試劑盒及標準品標簽上的標注為準。
洗滌液(20X)在低溫下可能有結晶，如果發(fā)現(xiàn)有結晶，請室溫水浴加熱使結晶完全溶解后再配制工作液。
為保證標準品的精確性，標準品配制使用后，如果有剩余請勿再次使用。
TMB對人體有刺激性，操作時請小心，并注意適當防護以避免直接接觸人體或吸入體內。。
如果發(fā)現(xiàn)TMB辣根過氧化物酶顯色液出現(xiàn)混濁或顏色變成藍色，應該停止使用。
加樣時，請注意每個樣品或標準品必須更換槍頭，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取體積的誤差。
不宜混用不同批號的試劑盒組份，每批次試劑盒均經(jīng)過獨立測試。
充分混勻對保證反應結果的精準性很重要，在加液后請輕輕晃動整個96孔板，以保證混勻。
本試劑盒很多操作在室溫進行，要求嚴格控制室溫在25-28℃。溫度低于25℃會導致最終檢測到的吸光度顯著下降。
洗滌過程非常重要，洗滌不充分會使精確度下降并導致結果誤差較大。
檢測標準品和樣品時建議設置重復孔，以確保檢測結果的可信度。
加樣過程中須避免氣泡的產(chǎn)生。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內。
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

Mouse TNF-α ELISA Kit (High-sensitive)

發(fā)表于由

產(chǎn)品編號

PT513
Mouse TNF-α ELISA Kit (High-sensitive)
96次

2941

生產(chǎn)的Mouse TNF-α ELISA Kit (Mouse TNF-α Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit)，即小鼠腫瘤壞死因子-α酶聯(lián)免疫吸附檢測試劑盒，是一種用于特異性地高靈敏地定量檢測小鼠血清、血漿或細胞培養(yǎng)上清液中的TNF-α的ELISA試劑盒。
本產(chǎn)品檢測靈敏度高，特異性強，重復性好。多次重復檢測結果表明，最小檢出量為6.9pg/ml，與人TNF-α、sTNF RIs、TNF RII等沒有交叉反應。板內、板間變異系數(shù)均小于10%。
TNF-α，即TNF、TNFα或TNFalpha，也稱cachectin、cachexin或TNFSF1A。TNF-α由巨噬細胞、上皮細胞等多種細胞在細菌 感染、內毒素刺激、病毒或寄生蟲感染時產(chǎn)生。腫瘤壞死因子超家族(Tumor necrosis factor superfamily)共約19個成員，包含由巨噬細胞等產(chǎn)生的TNF-α和T淋巴細胞產(chǎn)生的TNF-β (也稱Lymphotoxin-alpha)，以及FASL、TRAIL、CD40L、CD27L、CJP070L等。TNF-α與TNF-β在結構上有一定的相似性，并且在氨基酸水平有28%的同源性，它們擁有共同的受體TNFR1和TNFR2。由于TNF-α的生物學活性占TNF總活性的70%~95%，因此目前常說的TNF多指TNF-α。TNF (Tumor Necrosis Factor)因為能誘導細胞死亡而得名，實際上其很多時候誘導的細胞死亡為細胞凋亡。人TNF-α有兩種形式，一種是由233個氨基酸組成的跨膜蛋白同源三聚體(homotrimers)，另外一種是該跨膜蛋白在TNF-α轉化酶TACE (TNF-α converting enzyme)的作用下切除信號肽，形成成熟的157個氨基酸的可溶性TNF-α單體(分子量為17KDa)的同源三聚體。無論TNF-α的跨膜同源三聚體還是可溶性同源三聚體(51kD)，都具有生物學活性，但活性的差異目前仍有爭議。小鼠和人的TNF-α有約79%的氨基酸同源性，也同樣形成同源三聚體發(fā)揮作用。TNF-α可以誘導產(chǎn)生炎癥反應、發(fā)燒(fever)、細胞凋亡、抑制腫瘤形成和病毒復制等。TNF-α也參與了包括哮喘、克羅恩氏病、類風濕性關節(jié)炎、神經(jīng)性疼痛、阿茲海默癥、肥胖癥、II型糖尿病、自身免疫病和腫瘤等疾病的發(fā)生發(fā)展。

圖1. TNF-α的信號通路示意圖。
TNF-α被誘導分泌后，其同源三聚體與受體TNFR1 (TNF receptor, type I)或TNFR2 (TNF receptor, type II)結合而引發(fā)其下游信 號通路的一系列反應。TNF-α的信號通路參見圖1。TNFR1在大多數(shù)組織中有表達，而TNFR2主要在免疫細胞中表達。TNF-α的跨膜同源三聚體和可溶性同源三聚體都可以完全激活TNFR1，而TNFR2僅對TNF-α的跨膜同源三聚體產(chǎn)生響應。
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法(Sandwich ELISA)檢測樣品中小鼠TNF-α的濃度，其原理見圖1。小鼠TNF-α特異的單克隆捕獲抗體已預包被于酶標板上，當加入標準品或樣品時，其中的小鼠TNF-α會與捕獲抗體結合。當加入生物素化的抗小鼠TNF-α抗體后，生物素化抗小鼠TNF-α抗體與小鼠TNF-α結合，形成夾心的免疫復合物。隨后加入辣根過氧化物酶標記Streptavidin (HRP-Streptavidin)，由于生物素與鏈霉親和素(Streptavidin)可以特異性地結合，因此鏈霉親和素連接的HRP就會與夾心的免疫復合物連接起來而被固相捕獲。最后加入顯色劑TMB溶液，固相捕獲的辣根過氧化物酶就會催化無色的顯色劑氧化成藍色物質，在加入終止液后呈黃色。通過酶標儀檢測450nm處的吸光度值就能實現(xiàn)定量檢測。小鼠TNF-α濃度與A450值呈正比，通過繪制標準曲線，對照樣品吸光度值，即可計算出樣品中靶蛋白濃度。

圖1. 雙抗體夾心ELISA原理圖。
一個包裝的本試劑盒，包括標準品檢測，可以進行96次檢測。
包裝清單：

產(chǎn)品編號
產(chǎn)品名稱
包裝

PT513-1
小鼠TNF-α抗體預包被板
8孔×12條

PT513-2
樣本分析緩沖液
5ml

PT513-3
標準品稀釋液
10ml

PT513-4
小鼠TNF-α標準品
2-4瓶

PT513-5
小鼠TNF-α生物素化抗體
10ml

PT513-6
辣根過氧化物酶標記Streptavidin
10ml

PT513-7
洗滌液(20X)
30ml

PT513-8
TMB溶液
10ml

PT513-9
終止液
5ml

PT513-10
封板膜(透明)
2張

PT513-11
封板膜(白色)
2張

—
說明書
1份

保存條件：
標準品4℃保存，1-2周內有效，-20℃保存6個月內有效，試劑盒其它組分4℃保存6個月內有效。除標準品外，試劑盒其它組分嚴禁凍存。
注意事項：
由于標準品一般是凍干粉，在制備后需要嚴格校準，所以標準品的瓶數(shù)及每瓶標準品所需加入的稀釋液體積請以實際收到的試劑盒及標準品標簽上的標注為準。
洗滌液(20X)在低溫下可能有結晶，如果發(fā)現(xiàn)有結晶，請室溫水浴加熱使結晶完全溶解后再配制工作液。
為保證標準品的精確性，標準品配制使用后，如果有剩余請勿再次使用。
TMB溶液請勿接觸氧化劑和金屬，否則容易失效。
加樣時，請注意每個樣品或標準品必須更換槍頭，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取體積的誤差。
由于本試劑盒均經(jīng)過獨立測試，所以請勿混用不同貨號和不同批次的試劑盒組分，即使是同種試劑盒不同批次的試劑盒組分也不能混用。多個試劑盒同時檢測時，請獨立使用各個試劑盒中的試劑，請勿使用不同試劑盒中相同名稱的組分。
充分混勻對保證反應結果的精準性很重要，在加液后請輕輕晃動整個96孔板，以保證混勻。
本試劑盒很多操作在室溫進行，要求嚴格控制室溫在25-28℃。溫度低于25℃會導致最終檢測到的吸光度顯著下降。
洗滌過程非常重要，洗滌不充分會使精確度下降并導致結果誤差較大。
檢測標準品和樣品時建議設置重復孔，以確保檢測結果的可信度。
加樣過程中須避免氣泡的產(chǎn)生。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內。
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。