Cellufine™ ET clean是一款把聚（ε-賴氨酸）為配基固定在繊維素基球上的層析填料。 這種填料可選択性的結(jié)合様品中混入的內(nèi)毒素並將其去除。 配基（聚ε-賴氨酸）來源於放線菌（Streptomyces albulus）生産的25-35個(gè)賴氨酸聚合物。
Cellufine™ ET clean內(nèi)毒素去除填料是由熊本大學(xué)和Chisso株式會社共同開發(fā)的。聚賴氨酸被固定在氯甲基環(huán)氧乙烷活化的纖維素基球上， 其在用0.2 M NaOH和2 M NaCl的清洗液洗浄後依然保持非常安定的親和活性。
Cellufine™ ET clean可在生理pH下從細(xì)胞產(chǎn)物溶液中去除內(nèi)毒素，離子強(qiáng)度μ= 0.02-1.0，0°-25C°
通過Cellufine™ ET clean樹脂從蛋白質(zhì)溶液中特異性去除內(nèi)毒素
| 樣品溶液 | Cellufine™ ET clean S | Cellufine™ ET clean L | |||
| 樣品名稱(pI) | 處理前內(nèi)毒素濃度(pg/ml) | (0.02M PB, pH7.0, μ=0.05) | (0.02M PB + 0.36M NaCl, pH7.0, μ=0.40) | ||
| 處理后內(nèi)毒素濃度(pg/ml) | 蛋白質(zhì)回收(%) | 處理后內(nèi)毒素濃度(pg/ml) | 蛋白質(zhì)回收(%) | ||
| 卵清蛋白(4.6) | 28,000 | 81 | 99 | <10 | 95 |
| 牛血清白蛋白(4.9) | 32,000 | 45 | 99 | <10 | 97 |
| 肌紅蛋白(6.8) | 4,500 | 18 | 99 | <10 | 98 |
| 丙種球蛋白(7.4) | 5,600 | 20 | 99 | <10 | 97 |
| 細(xì)胞色素C(10.6) | 1,500 | 15 | 99 | <10 | 98 |
將 2 ml 蛋白質(zhì)溶液（1 mg/ml，LPS：各種蛋白質(zhì)試劑中的污染物）添加到 0.3 mL ET clean 中。1 個(gè)內(nèi)毒素單位 (EU) = 250pg LPS 可以換算。
溶菌酶 / ETclean L
柱層析
柱尺寸
10 x 0.9 cm (I.D.) (9.6 ml)
流速
0.5 ml / min (47 cm / h)
緩沖液
1 mM Tris-HCl, pH 7.3
梯度洗脫液
0 → 1.0 mol / l NaCl aq.
測定
– 280nm蛋白測定
– ET LAL法內(nèi)毒素測定
注射樣品 (1ml)
14 mg / ml