產(chǎn)品編號

PI485
Mouse/Rat IGF-I ELISA Kit
96次

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的Mouse/Rat IGF-I ELISA Kit (Mouse/Rat Insulin-like Growth Factor I Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit)，即小鼠/大鼠胰島素樣生長因子I酶聯(lián)免疫吸附檢測試劑盒，是一種用于特異性地高靈敏地定量檢測小鼠或大鼠血清、血漿、細(xì)胞或組織裂解液、或細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的IGF-I的ELISA試劑盒。本試劑盒適用于小鼠和大鼠IGF-I的檢測。
本產(chǎn)品檢測靈敏度高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好。多次重復(fù)檢測結(jié)果表明，最小檢出量為23.5pg/ml，與小鼠EGF、FGF-8b 、IGF-II，人IGF-I等均沒有交叉反應(yīng)，板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
胰島素樣生長因子I?(Insulin-like?Growth?Factor?I,?IGF-I)，又叫做生長調(diào)節(jié)素C，屬于胰島素亞族成員，是細(xì)胞代謝、分化和存活的重要調(diào)節(jié)因子。IGF-I以前蛋白原的形式合成，通過酶切作用得到成熟的IGF-I蛋白，成熟的IGF-I蛋白在哺乳動(dòng)物間具有高度保守性。成熟的小鼠IGF-I是一種非糖基化，氨基酸長度為70的分泌型多肽，與大鼠和人IGF-I分別具有99%和94%的序列相似性。IGF-I主要在肝臟和其它組織中合成，在體液中則主要與IGF結(jié)合蛋白(IGFBP)共同存在。IGFBP參與調(diào)節(jié)IGF功能，調(diào)節(jié)IGF對特定細(xì)胞表面受體的生物利用率大小。
IGF-I的功能主要受到兩種酪氨酸激酶受體調(diào)節(jié)：IGF-I?R和Insulin?R/CD220。兩種受體都是由二硫鍵連接形成的異質(zhì)四聚體復(fù)合物，包含兩個(gè)α亞基和兩個(gè)β亞基。IGF-I?R和Insulin?R所組成的異元復(fù)合物與IGF-I也具有較高的親和力，該復(fù)合物主要與IGF-I作用，可能會(huì)降低細(xì)胞對胰島素的應(yīng)答。IGF信號同時(shí)也受到IGFBP的調(diào)控，?IGF、IGFBP和IGF受體之間的相互作用會(huì)影響機(jī)體正常生長發(fā)育、代謝調(diào)控、血管新生、腫瘤生成和動(dòng)脈粥樣硬化等多種生理病理過程。
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法(Sandwich?ELISA)檢測樣品中IGF-I的濃度，其原理見圖1。IGF-I特異的單克隆捕獲抗體已預(yù)包被于酶標(biāo)板上，當(dāng)加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品時(shí)，其中的IGF-I會(huì)與捕獲抗體結(jié)合。當(dāng)加入生物素化的抗IGF-I抗體后，生物素化抗IGF-I抗體與IGF-I結(jié)合，形成夾心的免疫復(fù)合物。隨后加入辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin?(HRP-Streptavidin)，由于生物素與鏈霉親和素(Streptavidin)可以特異性地結(jié)合，因此鏈霉親和素連接的HRP就會(huì)與夾心的免疫復(fù)合物連接起來而被固相捕獲。最后加入顯色劑TMB溶液，固相捕獲的辣根過氧化物酶就會(huì)催化無色的顯色劑氧化成藍(lán)色物質(zhì)，在加入終止液后呈黃色。通過酶標(biāo)儀檢測450nm處的吸光度值就能實(shí)現(xiàn)定量檢測。IGF-I濃度與A450值呈正比，通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，對照樣品吸光度值，即可計(jì)算出樣品中IGF-I濃度。

圖1. 雙抗體夾心ELISA原理圖。

一個(gè)包裝的本試劑盒，包括標(biāo)準(zhǔn)品檢測，可以進(jìn)行96次檢測。
包裝清單：

產(chǎn)品編號

產(chǎn)品名稱

包裝

PI485-1

IGF-I抗體預(yù)包被板

8孔×12條

PI485-2

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(5X)

20ml

PI485-3

IGF-I標(biāo)準(zhǔn)品

2-4瓶

PI485-4

IGF-I生物素化抗體

10ml

PI485-5

辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin

10ml

PI485-6

洗滌液(20X)

30ml

PI485-7

TMB溶液

10ml

PI485-8

終止液

5ml

PI485-9

封板膜(透明)

2張

PI485-10

封板膜(白色)

2張

–

說明書

1份

保存條件：
標(biāo)準(zhǔn)品4℃保存，1-2周內(nèi)有效，-20℃保存6個(gè)月內(nèi)有效；試劑盒其它組分4℃保存6個(gè)月內(nèi)有效。除標(biāo)準(zhǔn)品外，試劑盒其它組分嚴(yán)禁凍存。
注意事項(xiàng)：
由于標(biāo)準(zhǔn)品一般是凍干粉，在制備后需要嚴(yán)格校準(zhǔn)，所以標(biāo)準(zhǔn)品的瓶數(shù)及每瓶標(biāo)準(zhǔn)品所需加入的稀釋液體積請以實(shí)際收到的試劑盒及標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)簽上的標(biāo)注為準(zhǔn)。
洗滌液(20X)在低溫下可能有結(jié)晶，如果發(fā)現(xiàn)有結(jié)晶，請室溫水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再配制工作液。
為保證標(biāo)準(zhǔn)品的精確性，標(biāo)準(zhǔn)品配制使用后，如果有剩余請勿再次使用。
TMB溶液請勿接觸氧化劑和金屬，否則容易失效。
加樣時(shí)，請注意每個(gè)樣品或標(biāo)準(zhǔn)品必須更換槍頭，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取體積的誤差。
由于本試劑盒均經(jīng)過獨(dú)立測試，所以請勿混用不同貨號和不同批次的試劑盒組分，即使是同種試劑盒不同批次的試劑盒組分也不能混用。多個(gè)試劑盒同時(shí)檢測時(shí)，請獨(dú)立使用各個(gè)試劑盒中的試劑，請勿使用不同試劑盒中相同名稱的組分。
充分混勻?qū)ΡＷC反應(yīng)結(jié)果的精準(zhǔn)性很重要，在加液后請輕輕晃動(dòng)整個(gè)96孔板，以保證混勻。
本試劑盒很多操作在室溫進(jìn)行，要求嚴(yán)格控制室溫在25-28℃。溫度低于25℃會(huì)導(dǎo)致最終檢測到的吸光度顯著下降。
洗滌過程非常重要，洗滌不充分會(huì)使精確度下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大。
檢測標(biāo)準(zhǔn)品和樣品時(shí)建議設(shè)置重復(fù)孔，以確保檢測結(jié)果的可信度。
加樣過程中須避免氣泡的產(chǎn)生。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。