產(chǎn)品編號
PC145
Human CCL3/MIP-1α ELISA Kit
96次
3198
的Human?CCL3/MIP-1α?ELISA?Kit?(Human?Macrophage?Inflammatory?Protein-1α?Enzyme-Linked?
ImmunoSorbent?Assay?Kit)，即人巨噬細胞炎性蛋白1α2酶聯(lián)免疫吸附檢測試劑盒，是一種用于特異性地高靈敏地定量檢測人血清、血漿或細胞培養(yǎng)上清液中的CCL3/MIP-1α的ELISA試劑盒。
本產(chǎn)品檢測靈敏度高，特異性強，重復性好。多次重復檢測結果表明，最小檢出量為4.6pg/ml，與MCP-1、EGF、ENA-78、G-CSF、GM-CSF、IL-1α、IL-1β、IL-6、小鼠CCL3等均沒有交叉反應，板內、板間變異系數(shù)均小于10%。
巨噬細胞炎性蛋白(Macrophage Inflammatory Protein-1, MIP-1α)，又稱CCL3 (Chemokine C-C motif Ligand 3)，屬于CC趨化因子亞族。人MIP-1α的cDNA編碼產(chǎn)生92個氨基酸的前體蛋白，其中具有22個氨基酸的信號肽，經(jīng)蛋白酶水解后得到分泌型的成熟MIP-1α?；罨腡細胞、B細胞、單核細胞、肥大細胞、中性粒細胞、星形膠質細胞、內皮細胞、成纖維細胞和平滑肌細胞均能產(chǎn)生MIP-1α。
與其它CC趨化因子相同，MIP-1α對單核細胞也具有化學趨化作用。另外，MIP-1α對T淋巴細胞、自然殺傷細胞、細胞毒性T細胞、嗜堿性粒細胞和嗜酸性粒細胞也有一定的化學趨化作用。MIP-1α還能夠作為肝細胞抑制劑，抑制造血祖細胞的增殖。CD8+T細胞所產(chǎn)生的MIP-1α、MIP-1β和RANTES均被認為是重要的HIV抑制因子。
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法(Sandwich ELISA)檢測樣品中人CCL3/MIP-1α的濃度，其原理見圖1。人CCL3/MIP-1α特異的單克隆捕獲抗體已預包被于酶標板上，當加入標準品或樣品時，其中的人CCL3/MIP-1α會與捕獲抗體結合。當加入生物素化的抗人CCL3/MIP-1α抗體后，生物素化抗人CCL3/MIP-1α抗體與人CCL3/MIP-1α結合，形成夾心的免疫復合物。隨后加入辣根過氧化物酶標記Streptavidin (HRP-Streptavidin)，由于生物素與鏈霉親和素(Streptavidin)可以特異性地結合，因此鏈霉親和素連接的HRP就會與夾心的免疫復合物連接起來而被固相捕獲。最后加入顯色劑TMB溶液，固相捕獲的辣根過氧化物酶就會催化無色的顯色劑氧化成藍色物質，在加入終止液后呈黃色。通過酶標儀檢測450nm處的吸光度值就能實現(xiàn)定量檢測。人CCL3/MIP-1α濃度與A450值呈正比，通過繪制標準曲線，對照樣品吸光度值，即可計算出樣品中人CCL3/MIP-1α濃度。
圖1. 雙抗體夾心ELISA原理圖。
一個包裝的本試劑盒，包括標準品檢測，可以進行96次檢測。
包裝清單：
產(chǎn)品編號
產(chǎn)品名稱
包裝
PC145-1
人CCL3/MIP-1α抗體預包被板
8孔×12條
PC145-2
樣品分析緩沖液
5ml
PC145-3
標準品稀釋液(5X)
10ml
PC145-4
人CCL3/MIP-1α標準品
2-4瓶
PC145-5
人CCL3/MIP-1α生物素化抗體
10ml
PC145-6
辣根過氧化物酶標記Streptavidin
10ml
PC145-7
洗滌液(20X)
30ml
PC145-8
TMB溶液
10ml
PC145-9
終止液
5ml
PC145-10
封板膜(透明)
2張
PC145-11
封板膜(白色)
2張
–
說明書
1份
保存條件：
標準品4℃保存，1-2周內有效，-20℃保存6個月內有效；試劑盒其它組分4℃保存6個月內有效。除標準品外，試劑盒其它組分嚴禁凍存。
注意事項：
由于標準品一般是凍干粉，在制備后需要嚴格校準，所以標準品的瓶數(shù)及每瓶標準品所需加入的稀釋液體積請以實際收到的試劑盒及標準品標簽上的標注為準。
洗滌液(20X)在低溫下可能有結晶，如果發(fā)現(xiàn)有結晶，請室溫水浴加熱使結晶完全溶解后再配制工作液。
為保證標準品的精確性，標準品配制使用后，如果有剩余請勿再次使用。
TMB溶液請勿接觸氧化劑和金屬，否則容易失效。
加樣時，請注意每個樣品或標準品必須更換槍頭，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取體積的誤差。
由于本試劑盒均經(jīng)過獨立測試，所以請勿混用不同貨號和不同批次的試劑盒組分，即使是同種試劑盒不同批次的試劑盒組分也不能混用。多個試劑盒同時檢測時，請獨立使用各個試劑盒中的試劑，請勿使用不同試劑盒中相同名稱的組分。
充分混勻對保證反應結果的精準性很重要，在加液后請輕輕晃動整個96孔板，以保證混勻。
本試劑盒很多操作在室溫進行，要求嚴格控制室溫在25-28℃。溫度低于25℃會導致最終檢測到的吸光度顯著下降。
洗滌過程非常重要，洗滌不充分會使精確度下降并導致結果誤差較大。
檢測標準品和樣品時建議設置重復孔，以確保檢測結果的可信度。
加樣過程中須避免氣泡的產(chǎn)生。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內。
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。