屬性
生物來源
mouse
質(zhì)量水平
100
300
抗體形式
purified immunoglobulin
antibody product type
primary antibodies
克隆
81 (mAB O4), monoclonal
species reactivity
rat, mouse, human, chicken
manufacturer/tradename
Chemicon
technique(s)
immunocytochemistry: suitable
immunohistochemistry: suitable
同位素/亞型
IgM
適用性
not suitable for Western blot
not suitable for immunoprecipitation
運(yùn)輸
wet ice
說明
特異性
識(shí)別少突膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志物O4。也可與精子中的某些半乳糖脂反應(yīng)（列表請(qǐng)參見其他信息庫(kù)）。
應(yīng)用
免疫組化：在未固定速凍切片上10-20μg/ml。
免疫細(xì)胞化學(xué)：在用4%多聚甲醛固定的細(xì)胞上10-20 μg/mL。
注意：O4是一種硫化物，可被有機(jī)溶劑溶出薄膜；丙酮和甲醇不能用于固定。
最佳工作稀釋度必須由最終用戶進(jìn)行確定。
免疫組織化學(xué)方案
1.用未固定速凍組織制備切片。切片厚度應(yīng)為4-5 μm。將切片放在顯微鏡載玻片上。
2.室溫下在PBST中洗滌載玻片3次，每次5分鐘。
3.阻斷非特異性結(jié)合位點(diǎn)，將切片置于含5% FCS的潮濕室內(nèi)室溫孵育30分鐘。
4.按第2步所述方法洗滌載玻片。
5.用足夠量的MAB345 (10-20 μg/mL，PBS)覆蓋切片，并在37°C的潮濕箱中孵育1小時(shí)。
6.用PBS快速洗滌載玻片3次。仔細(xì)干燥要染色的區(qū)域。
7.用足夠量的抗小鼠IgM-熒光素*溶液覆蓋切片，并在37°C的潮濕箱中孵育1小時(shí)。
8.按第6步所述方法洗滌載玻片。
9.用合適的包埋介質(zhì)覆蓋切片，蓋上蓋片，用熒光顯微鏡檢查。
*也可以使用HRP或ABC。
通過滴定一級(jí)和二級(jí)抗體可獲得最佳結(jié)果。
免疫細(xì)胞化學(xué)
1.用4%多聚甲醛(PBS中)在室溫下固定制劑10分鐘。O4是一種硫化物，可被有機(jī)溶劑溶出薄膜；丙酮和甲醇不能用于固定。
2.室溫下在PBST中洗滌載玻片3次，每次5分鐘。
3.阻斷非特異性結(jié)合位點(diǎn)，將切片置于含5% FCS的潮濕室內(nèi)室溫孵育30分鐘。
4.按第2步所述方法洗滌載玻片。
5.用足夠量的MAB345 (10-20 μg/mL，PBS)覆蓋切片，并在37°C的潮濕箱中孵育1小時(shí)。
6.用PBS快速洗滌載玻片3次。仔細(xì)干燥要染色的區(qū)域。
7.用足夠量的抗小鼠IgM-熒光素*溶液覆蓋切片，并在37°C的潮濕箱中孵育1小時(shí)。
8.按第6步所述方法洗滌載玻片。
9.用合適的包埋介質(zhì)覆蓋切片，蓋上蓋玻片，用熒光顯微鏡檢查。
注意：在染色過程中，請(qǐng)勿使制劑干燥。
抗O4抗體，克隆81是一種抗O4的抗體，可用于IC、IH，已有超過50次產(chǎn)品引用。
外形
Ammonium Sulfate Precipitation
形式：純化
純化的免疫球蛋白置于0.05M磷酸鉀緩沖液中，pH 8.0，加入0.3M NaCl和0.05%疊氮化鈉。
分析說明
對(duì)照
大鼠皮質(zhì)干細(xì)胞或小鼠胚胎腦3天細(xì)胞培養(yǎng)
