產(chǎn)品編號
JP2080S
BeyoChIP? ChIP Assay Kit (Protein A/G磁珠)
22次
1998
BeyoChIP? ChIP Assay Kit (Protein A/G磁珠)即BeyoChIP? Chromatin Immunoprecipitation (ChIP) Assay Kit with Protein A/G Magnetic Beads,也稱染色質(zhì)免疫沉淀檢測試劑盒或ChIP檢測試劑盒(蛋白A/G磁珠),用于通過免疫沉淀來沉淀和目標蛋白結合的染色質(zhì)片段,最后通過PCR或Southern等方法來檢測沉淀的染色質(zhì)片段的試劑盒。通常用于檢測特定的轉錄因子或組蛋白等基因組DNA結合蛋白是否和預期的特定基因組DNA序列在同一復合物中[1-2]。
通過ChIP檢測可以獲得在體的(In Vivo)目標蛋白和預期基因組DNA片段是否在同一復合物中的結論。EMSA,也稱gel shift獲得的結果是體外的(In Vitro)目標蛋白和預期基因組DNA片段的結合結果,可以推斷細胞內(nèi)也發(fā)生類似的結合,但并不代表該情況在細胞內(nèi)也真實發(fā)生。而ChIP的檢測結果則可明確說明這種結合在細胞內(nèi)是真實發(fā)生的[1-2]。
本ChIP Assay Kit采用了Protein A/G磁珠(Protein A/G Magnetic Beads),和Protein A磁珠或Protein G磁珠相比適合于免疫沉淀更多種類的抗體,包括mouse IgG1, IgG2a, IgG2b, IgG3, IgA, rat IgG1, IgG2a, IgG2b, IgG2c, rabbit IgG, rabbit and goat polyclonal Abs,以及human IgG1, IgG2, IgG3和IgG4。磁珠法比瓊脂糖法更方便、快捷。常規(guī)的瓊脂糖法需要長時間離心,而磁珠法無需離心,只需要短時間磁性分離即可,可以有效避免因為離心對免疫復合物造成的機械力影響,充分保證免疫復合物的天然狀態(tài)。
本試劑盒中經(jīng)過Salmon Sperm DNA預飽和的Protein A/G Agarose和目的基因組DNA的非特異性結合大大下降。如果ChIP產(chǎn)物用于染色質(zhì)免疫共沉淀測序(ChIP-Seq),需要從數(shù)據(jù)中去除可能的Salmon Sperm DNA數(shù)據(jù)。
提供了預混合的對照引物(Control Primers)??捎糜跀U增human GAPDH的部分相應序列,引物序列為:5′-TACTAGCGGTTTTACGGGCG-3’;5′-TCGAACAGGAGGAGCAGAGAGCGA-3’。
本試劑盒如果用于常規(guī)的染色質(zhì)免疫沉淀,共可以免疫沉淀22個樣品。
包裝清單:
產(chǎn)品編號
產(chǎn)品名稱
包裝
JP2080S-1
Protein A/G Magnetic Beads/Salmon Sperm DNA
3ml
JP2080S-2
Glycine Solution (10X)
30ml
JP2080S-3
ChIP Dilution Buffer
48ml
JP2080S-4
Low Salt Immune Complex Wash Buffer
24ml
JP2080S-5
High Salt Immune Complex Wash Buffer
24ml
JP2080S-6
LiCl Immune Complex Wash Buffer
24ml
JP2080S-7
TE Buffer
48ml
JP2080S-8
0.5M EDTA
250μl
JP2080S-9
5M NaCl
500μl
JP2080S-10
1M Tris, pH 6.5
500μl
JP2080S-11
SDS Lysis Buffer
10ml
JP2080S-12
Control Primers (5μM each)
0.1ml
—
說明書
1份
保存條件:
4℃保存,一年有效。長期不使用可以-20℃保存,-20℃保存可以保存更長時間。
注意事項:
需自備用于ChIP的一抗,37%甲醛,PBS (JJP0100221A),蛋白酶抑制劑混合物(哺乳動物樣品抽提用, 100X) (JP1010/JP1011)、蛋白酶磷酸酶抑制劑混合物(哺乳動物樣品抽提用, 50X) (JP1050/JP1051)或PMSF (JP56/JP57),Elution Buffer (1% SDS, 0.1M NaHCO3),蛋白酶K (JJP5032/JJP5033),Glycogen (DNase, RNase & Protease free) (D0816)或Glycogen (核酸沉淀用) (D0812),Tris平衡苯酚,氯仿,95%乙醇,70%乙醇,3M NaAc (pH5.2) (JJP3051)以及細胞刮(FSCJJP20/FSCJJP20)或細胞鏟(FLFT021),磁力架(FMS004/FMS008/FMS016/FMS024)。
需自備樣品超聲處理儀(sonicator),也稱超聲粉碎機或超聲細胞粉碎機。
使用甲醛時請在通風櫥中進行操作。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。