產(chǎn)品編號
JP2080S
BeyoChIP? ChIP Assay Kit (Protein A/G磁珠)
22次
1998
BeyoChIP? ChIP Assay Kit (Protein A/G磁珠)即BeyoChIP? Chromatin Immunoprecipitation (ChIP) Assay Kit with Protein A/G Magnetic Beads，也稱染色質(zhì)免疫沉淀檢測試劑盒或ChIP檢測試劑盒(蛋白A/G磁珠)，用于通過免疫沉淀來沉淀和目標(biāo)蛋白結(jié)合的染色質(zhì)片段，最后通過PCR或Southern等方法來檢測沉淀的染色質(zhì)片段的試劑盒。通常用于檢測特定的轉(zhuǎn)錄因子或組蛋白等基因組DNA結(jié)合蛋白是否和預(yù)期的特定基因組DNA序列在同一復(fù)合物中[1-2]。
通過ChIP檢測可以獲得在體的(In Vivo)目標(biāo)蛋白和預(yù)期基因組DNA片段是否在同一復(fù)合物中的結(jié)論。EMSA，也稱gel shift獲得的結(jié)果是體外的(In Vitro)目標(biāo)蛋白和預(yù)期基因組DNA片段的結(jié)合結(jié)果，可以推斷細(xì)胞內(nèi)也發(fā)生類似的結(jié)合，但并不代表該情況在細(xì)胞內(nèi)也真實(shí)發(fā)生。而ChIP的檢測結(jié)果則可明確說明這種結(jié)合在細(xì)胞內(nèi)是真實(shí)發(fā)生的[1-2]。
本ChIP Assay Kit采用了Protein A/G磁珠(Protein A/G Magnetic Beads)，和Protein A磁珠或Protein G磁珠相比適合于免疫沉淀更多種類的抗體，包括mouse IgG1, IgG2a, IgG2b, IgG3, IgA, rat IgG1, IgG2a, IgG2b, IgG2c, rabbit IgG, rabbit and goat polyclonal Abs，以及human IgG1, IgG2, IgG3和IgG4。磁珠法比瓊脂糖法更方便、快捷。常規(guī)的瓊脂糖法需要長時間離心，而磁珠法無需離心，只需要短時間磁性分離即可，可以有效避免因?yàn)殡x心對免疫復(fù)合物造成的機(jī)械力影響，充分保證免疫復(fù)合物的天然狀態(tài)。
本試劑盒中經(jīng)過Salmon Sperm DNA預(yù)飽和的Protein A/G Agarose和目的基因組DNA的非特異性結(jié)合大大下降。如果ChIP產(chǎn)物用于染色質(zhì)免疫共沉淀測序(ChIP-Seq)，需要從數(shù)據(jù)中去除可能的Salmon Sperm DNA數(shù)據(jù)。
提供了預(yù)混合的對照引物(Control Primers)?？捎糜跀U(kuò)增human GAPDH的部分相應(yīng)序列，引物序列為：5′-TACTAGCGGTTTTACGGGCG-3’；5′-TCGAACAGGAGGAGCAGAGAGCGA-3’。
本試劑盒如果用于常規(guī)的染色質(zhì)免疫沉淀，共可以免疫沉淀22個樣品。
包裝清單：
產(chǎn)品編號
產(chǎn)品名稱
包裝
JP2080S-1
Protein A/G Magnetic Beads/Salmon Sperm DNA
3ml
JP2080S-2
Glycine Solution (10X)
30ml
JP2080S-3
ChIP Dilution Buffer
48ml
JP2080S-4
Low Salt Immune Complex Wash Buffer
24ml
JP2080S-5
High Salt Immune Complex Wash Buffer
24ml
JP2080S-6
LiCl Immune Complex Wash Buffer
24ml
JP2080S-7
TE Buffer
48ml
JP2080S-8
0.5M EDTA
250μl
JP2080S-9
5M NaCl
500μl
JP2080S-10
1M Tris, pH 6.5
500μl
JP2080S-11
SDS Lysis Buffer
10ml
JP2080S-12
Control Primers (5μM each)
0.1ml
—
說明書
1份
保存條件：
4℃保存，一年有效。長期不使用可以-20℃保存，-20℃保存可以保存更長時間。
注意事項(xiàng)：
需自備用于ChIP的一抗，37%甲醛，PBS (JJP0100221A)，蛋白酶抑制劑混合物(哺乳動物樣品抽提用, 100X) (JP1010/JP1011)、蛋白酶磷酸酶抑制劑混合物(哺乳動物樣品抽提用, 50X) (JP1050/JP1051)或PMSF (JP56/JP57)，Elution Buffer (1% SDS, 0.1M NaHCO3)，蛋白酶K (JJP5032/JJP5033)，Glycogen (DNase, RNase & Protease free) (D0816)或Glycogen (核酸沉淀用) (D0812)，Tris平衡苯酚，氯仿，95%乙醇，70%乙醇，3M NaAc (pH5.2) (JJP3051)以及細(xì)胞刮(FSCJJP20/FSCJJP20)或細(xì)胞鏟(FLFT021)，磁力架(FMS004/FMS008/FMS016/FMS024)。
需自備樣品超聲處理儀(sonicator)，也稱超聲粉碎機(jī)或超聲細(xì)胞粉碎機(jī)。
使用甲醛時請在通風(fēng)櫥中進(jìn)行操作。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
