EZ poly™in vivo mRNA活體轉(zhuǎn)染試劑(NBS2122)

EZ poly™in vivo mRNA活體轉(zhuǎn)染試劑

 

產(chǎn)品編號(hào)

產(chǎn)品名稱

包裝規(guī)格

NBS2122-0.5ml

EZ poly™in vivo mRNA活體轉(zhuǎn)染試劑

0.5ml

NBS2122-1ml

EZ poly™in vivo mRNA活體轉(zhuǎn)染試劑

1ml

NBS2122-5ml

EZ poly™in vivo mRNA活體轉(zhuǎn)染試劑

5x1ml

 

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

EZ poly™in vivo mRNA活體轉(zhuǎn)染試劑是一款體內(nèi)專用型基因轉(zhuǎn)染試劑,可通過肌肉注射的方式將mRNA遞送傳送至體內(nèi)并在注射部位高效表達(dá)目的蛋白。與其它mRNA專用體內(nèi)轉(zhuǎn)染試劑相比,具有操作簡(jiǎn)便、體內(nèi)毒性低、穩(wěn)定性好、體內(nèi)轉(zhuǎn)染效率及蛋白表達(dá)量高等優(yōu)點(diǎn)。

 

應(yīng)用范圍:

EZ poly™in vivo mRNA活體轉(zhuǎn)染試劑可被應(yīng)用于mRNA疫苗研發(fā)或基因治療等相關(guān)工作的研究中。可用于遞送熒光標(biāo)記的mRNA或具有特殊功能的mRNA,并在體內(nèi)高效表達(dá)??蓾M足基礎(chǔ)科研、初期工藝開發(fā)及臨床前實(shí)驗(yàn)研究使用。

 

保存條件

2-8℃保存一年

 

運(yùn)輸

常溫運(yùn)輸

 

體內(nèi)轉(zhuǎn)染方法:

以體重20g小鼠,mRNA注射10μg為例,參考1調(diào)整,步驟如下:

 

1

試劑準(zhǔn)備按照1用量首先取30 μL EZ poly™in vivo mRNA活體轉(zhuǎn)染試劑放置于樣品管中

2

復(fù)合物制備10μLmRNA(濃度為1μg/μL)與轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行直接復(fù)合

3

室溫靜止20分鐘

4

補(bǔ)加葡萄糖注射液80μL的葡萄糖注射液加入到上面復(fù)合物溶液中

5

通過肌肉注射的方式,注射于鼠體內(nèi),6~24小時(shí)后檢測(cè)mRNA在鼠體內(nèi)的蓄積或表達(dá)

 

體內(nèi)轉(zhuǎn)染條件的優(yōu)化:

可通過改變mRNA的用量和濃度以及EZ poly™in vivo mRNA活體轉(zhuǎn)染試劑體內(nèi)轉(zhuǎn)染試劑濃度對(duì)體內(nèi)分布或蛋白表達(dá)情況進(jìn)行優(yōu)化。EZ poly™in vivo mRNA活體轉(zhuǎn)染試劑(μL): mRNA (μg)可以在4:12:1之間調(diào)整。根據(jù)鼠體重的不同,葡萄糖注射液的補(bǔ)加體積可以在推薦量±30μL之間調(diào)節(jié)。優(yōu)化方法參考2。使用熒光標(biāo)記mRNA的活體分布實(shí)驗(yàn),建議在注射后4-6小時(shí)開始檢測(cè),熒光素酶標(biāo)記mRNA的活體分布實(shí)驗(yàn),建議在注射后6小時(shí)開始檢測(cè)。

  

1.  不同體重鼠的體內(nèi)用量推薦

 

鼠體重

葡萄糖注射液

補(bǔ)加體積

葡萄糖注射液

釋后終體積

mRNA推薦用量

試劑用量

mRNA

15g

88 μL

120 μL

24μL

8 μg

20g

80 μL

120 μL

30 μL

10 μg

25g

72 μL

120 μL

36 μL

12 μg

30g

60 μL

120 μL

45 μL

15 μg

 

2.  體重20g鼠的優(yōu)化復(fù)合方式推薦

 

鼠體重

葡萄糖注射液

補(bǔ)加體積

葡萄糖注射液

釋后終體積

mRNA推薦用量

試劑用量

mRNA

20g

112 μL

120 μL

6 μL

2 μg

20g

100 μL

120 μL

15 μL

5 μg

20g

80 μL

120 μL

30 μL

10 μg

20g

40 μL

120 μL

60 μL

20 μg

 

一:轉(zhuǎn)染效率低

影響細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的因素有很多。首先,與所轉(zhuǎn)染細(xì)胞有關(guān),有的細(xì)胞容易轉(zhuǎn)染,如HeLa、B16F10、293T等。有的細(xì)胞不易轉(zhuǎn)染,如4T1、NIH3T3、BMDC等。其次,與轉(zhuǎn)染試劑的用量及與DNA的比例有關(guān),在最佳的轉(zhuǎn)染比例附近可以達(dá)到最佳的轉(zhuǎn)染效果。最后,沒有使用最適宜的細(xì)胞密度,應(yīng)根據(jù)各種轉(zhuǎn)染試劑的說(shuō)明書中推薦的細(xì)胞密度進(jìn)行細(xì)胞接種,更有利于提高轉(zhuǎn)染效率。


二:轉(zhuǎn)染效果不穩(wěn)定,不能重現(xiàn)

轉(zhuǎn)染效果不穩(wěn)定一般與兩個(gè)因素緊密相關(guān),一個(gè)是轉(zhuǎn)染試劑的穩(wěn)定性,另一個(gè)是基因的穩(wěn)定性。轉(zhuǎn)染試劑應(yīng)按照說(shuō)明書建議的保存溫度及條件進(jìn)行保存。如使用脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑,則不建議反復(fù)凍融,會(huì)引起該轉(zhuǎn)染試劑結(jié)構(gòu)上的變化。基因如短時(shí)間內(nèi)連續(xù)使用,可放置于4℃保存。若超過10天不使用,建議置于-20℃或-80℃長(zhǎng)期儲(chǔ)存以降低核酸的降解速度。


三:細(xì)胞毒性大

導(dǎo)致轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞毒性大的因素有很多,例如DNA的用量過大、轉(zhuǎn)染試劑的用量過大、轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞狀態(tài)較差以及培養(yǎng)基中抗生素的加入等。建議嚴(yán)格按照所選擇轉(zhuǎn)染試劑的說(shuō)明書進(jìn)行操作,以避免細(xì)胞毒性大的問題。

四:沒有生成高效率的DNA轉(zhuǎn)染試劑復(fù)合物

沒有生成高效復(fù)合物的因素有很多。首先,可能是沒有選對(duì)合適的轉(zhuǎn)染試劑。挑選轉(zhuǎn)染試劑時(shí)應(yīng)考慮基因的種類及分子量等因素。其次,有的轉(zhuǎn)染試劑對(duì)血清的影響很大,應(yīng)在無(wú)血清情況下進(jìn)行轉(zhuǎn)染。使用諾寧生物的EZ poly™  系列轉(zhuǎn)染試劑無(wú)需考慮血清對(duì)轉(zhuǎn)染體系的影響,可在含血清培養(yǎng)基中進(jìn)行轉(zhuǎn)染。

五:使用錯(cuò)誤的轉(zhuǎn)染操作步驟

無(wú)論使用哪一款基因轉(zhuǎn)染試劑,都應(yīng)嚴(yán)格按照該轉(zhuǎn)染試劑的說(shuō)明書進(jìn)行操作,其中包括轉(zhuǎn)染試劑的用量、基因用量、最佳轉(zhuǎn)染比例、孵育時(shí)間、檢測(cè)時(shí)間等重要因素。

六:轉(zhuǎn)染試劑有時(shí)呈云霧狀渾濁

如發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)染試劑出現(xiàn)云霧狀渾濁應(yīng)立即聯(lián)系客服人員?;蜣D(zhuǎn)染試劑一般都呈清澈透明狀態(tài),呈云霧狀渾濁可能是由于轉(zhuǎn)染試劑發(fā)生了污染或儲(chǔ)存溫度太低,請(qǐng)務(wù)必按照試劑說(shuō)明書要求的溫度進(jìn)行儲(chǔ)存。如出現(xiàn)此現(xiàn)象,建議溫浴10分鐘后,觀察是否澄清。


七:轉(zhuǎn)染復(fù)合物出現(xiàn)沉淀

當(dāng)轉(zhuǎn)染試劑和基因的用量都高于說(shuō)明書用量,或復(fù)合物的孵育體系體積小于說(shuō)明書建議時(shí),由于體系中過量的電荷發(fā)生了聚集會(huì)導(dǎo)致體系中的復(fù)合物出現(xiàn)沉淀。建議要嚴(yán)格參考說(shuō)明書的用量進(jìn)行轉(zhuǎn)染。


八:siRNA轉(zhuǎn)染時(shí),基因沉默效率不夠高

影響siRNA沉默效率的因素很多,如基因本身是否被環(huán)境中的RNA酶污染降解?或所使用的細(xì)胞是否為難轉(zhuǎn)染細(xì)胞?以及是否按照說(shuō)明書建議的用量進(jìn)行了操作等。首先應(yīng)該選擇合適的siRNA基因轉(zhuǎn)染試劑,確保細(xì)胞密度在60-70%之間,并嚴(yán)格按照說(shuō)明書建議的用量去使用操作。


九:DNA-siRNA共轉(zhuǎn)染時(shí),基因沉默效率不夠高

當(dāng)細(xì)胞同時(shí)轉(zhuǎn)染DNA和siRNA時(shí),建議使用分別轉(zhuǎn)染的方式進(jìn)行。即使用基因轉(zhuǎn)染試劑分別與DNA和siRNA進(jìn)行復(fù)合,再將兩個(gè)復(fù)合物體系分兩次分別加入到同一個(gè)裝有細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)孔中。因DNA和RNA的轉(zhuǎn)染機(jī)理不相同,如只想使用一種轉(zhuǎn)染試劑同時(shí)轉(zhuǎn)染兩種基因,建議一定要使用通用型基因轉(zhuǎn)染試劑,如EZ poly™ 系列的DNA/RNA產(chǎn)品,即可以轉(zhuǎn)染DNA又可以轉(zhuǎn)染RNA。

EZ poly™mRNA轉(zhuǎn)染試劑(NBS2052)

EZ polymRNA轉(zhuǎn)染試劑

 

產(chǎn)品編號(hào)

產(chǎn)品名稱

包裝規(guī)格

NBS2052-0.5ml

EZ polymRNA轉(zhuǎn)染試劑

0.5ml

NBS2052-1ml

EZ polymRNA轉(zhuǎn)染試劑

1ml

NBS2052-5ml

EZ polymRNA轉(zhuǎn)染試劑

5x1ml

 

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

EZ polymRNA轉(zhuǎn)染試劑是一款高性能的mRNA專用轉(zhuǎn)染試劑,可用于mRNA在多種貼壁細(xì)胞中的傳送??芍苯訉?span>mRNA傳遞到細(xì)胞質(zhì)中進(jìn)行表達(dá),避免了轉(zhuǎn)錄調(diào)控作用及進(jìn)入細(xì)胞核的限制??杀粦?yīng)用在短期蛋白表達(dá)的相關(guān)研究工作中。

 

應(yīng)用范圍:

EZ polymRNA轉(zhuǎn)染試劑可適用于眾多貼壁或懸浮細(xì)胞株的mRNA轉(zhuǎn)染。在各種常規(guī)、難轉(zhuǎn)、原代細(xì)胞及干細(xì)胞中均可得到較高的轉(zhuǎn)染效率,且性能穩(wěn)定。與其它轉(zhuǎn)染試劑相比,具有不受血清影響、毒性低、穩(wěn)定性好、轉(zhuǎn)染簡(jiǎn)單易行、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)。

 

保存條件

2-8℃保存一年

 

運(yùn)輸

常溫運(yùn)輸

 

mRNA的轉(zhuǎn)染:

  24孔板為例,請(qǐng)參考1的轉(zhuǎn)染規(guī)模調(diào)整,步驟如下:

  

1

細(xì)胞接種: 每孔接種0 . 5 ~ 1 . 0 × 105 個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞培養(yǎng) 12~24小時(shí),使轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞密度達(dá)到60~70%融合度

2

mRNA稀釋: 0.5μgmRNA加入到Opti-MEM培養(yǎng)基中,稀釋后的終體積為10μL

3

轉(zhuǎn)染試劑稀釋: 1μLEZ polymRNA轉(zhuǎn)染試劑加入到9μL Opti-MEM培養(yǎng)基中,稀釋后的終體積為10μL

4

復(fù)合物制備:將上述mRNA稀釋液和轉(zhuǎn)染試劑稀釋液混合,輕輕吹打均勻后,室溫靜置10分鐘

5

將上述20μL復(fù)合物加入到24孔板中,輕輕吹打混勻,繼續(xù)培養(yǎng)18~48小時(shí)后檢測(cè)轉(zhuǎn)染效率,無(wú)需更換培養(yǎng)基

mRNA的轉(zhuǎn)染優(yōu)化:

可通過改變細(xì)胞密度、mRNA濃度以及EZ polymRNA轉(zhuǎn)染試劑濃度對(duì)轉(zhuǎn)染進(jìn)行優(yōu)化。保證細(xì)胞融合度在60%以上,EZ polymRNA轉(zhuǎn)染試劑(μL): mRNA (μg)可以在1:15:1之間調(diào)整。轉(zhuǎn)染步驟與DNA相同,請(qǐng)參考1的轉(zhuǎn)染規(guī)模進(jìn)行調(diào)整,所有數(shù)量和體積均是按孔計(jì)算。轉(zhuǎn)染高密度細(xì)胞可獲得高轉(zhuǎn)染效率、高表達(dá)水平和低細(xì)胞毒性。

  

1.  不同培養(yǎng)板所需轉(zhuǎn)染試劑和mRNA的用量

培養(yǎng)板

單孔面積

接種

培養(yǎng)基

Opti-MEM

養(yǎng)基釋后終體積

mRNA轉(zhuǎn)染

試劑用量

mRNA

96孔板

0.3cm2

200μL

10μL

0.4μL

0.2μg

24孔板

2.0cm2

500μL

20μL

1.0μL

0.5μg

12孔板

4.0cm2

1mL

40μL

2.0μL

1.0μg

6孔板

10.0cm2

2mL

100μL

4.0μL

2.0μg

60mm

20.0cm2

5mL

0.2mL

8.0μL

4.0μg

100mm

60.0cm2

15mL

0.6mL

24.0μL

12.0μg

EZ poly™mRNA轉(zhuǎn)染試劑(NBS2052) 

一:轉(zhuǎn)染效率低

影響細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的因素有很多。首先,與所轉(zhuǎn)染細(xì)胞有關(guān),有的細(xì)胞容易轉(zhuǎn)染,如HeLa、B16F10、293T等。有的細(xì)胞不易轉(zhuǎn)染,如4T1、NIH3T3、BMDC等。其次,與轉(zhuǎn)染試劑的用量及與DNA的比例有關(guān),在最佳的轉(zhuǎn)染比例附近可以達(dá)到最佳的轉(zhuǎn)染效果。最后,沒有使用最適宜的細(xì)胞密度,應(yīng)根據(jù)各種轉(zhuǎn)染試劑的說(shuō)明書中推薦的細(xì)胞密度進(jìn)行細(xì)胞接種,更有利于提高轉(zhuǎn)染效率。


二:轉(zhuǎn)染效果不穩(wěn)定,不能重現(xiàn)

轉(zhuǎn)染效果不穩(wěn)定一般與兩個(gè)因素緊密相關(guān),一個(gè)是轉(zhuǎn)染試劑的穩(wěn)定性,另一個(gè)是基因的穩(wěn)定性。轉(zhuǎn)染試劑應(yīng)按照說(shuō)明書建議的保存溫度及條件進(jìn)行保存。如使用脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑,則不建議反復(fù)凍融,會(huì)引起該轉(zhuǎn)染試劑結(jié)構(gòu)上的變化?;蛉缍虝r(shí)間內(nèi)連續(xù)使用,可放置于4℃保存。若超過10天不使用,建議置于-20℃或-80℃長(zhǎng)期儲(chǔ)存以降低核酸的降解速度。


三:細(xì)胞毒性大

導(dǎo)致轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞毒性大的因素有很多,例如DNA的用量過大、轉(zhuǎn)染試劑的用量過大、轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞狀態(tài)較差以及培養(yǎng)基中抗生素的加入等。建議嚴(yán)格按照所選擇轉(zhuǎn)染試劑的說(shuō)明書進(jìn)行操作,以避免細(xì)胞毒性大的問題。

四:沒有生成高效率的DNA轉(zhuǎn)染試劑復(fù)合物

沒有生成高效復(fù)合物的因素有很多。首先,可能是沒有選對(duì)合適的轉(zhuǎn)染試劑。挑選轉(zhuǎn)染試劑時(shí)應(yīng)考慮基因的種類及分子量等因素。其次,有的轉(zhuǎn)染試劑對(duì)血清的影響很大,應(yīng)在無(wú)血清情況下進(jìn)行轉(zhuǎn)染。使用諾寧生物的EZ poly™  系列轉(zhuǎn)染試劑無(wú)需考慮血清對(duì)轉(zhuǎn)染體系的影響,可在含血清培養(yǎng)基中進(jìn)行轉(zhuǎn)染。

五:使用錯(cuò)誤的轉(zhuǎn)染操作步驟

無(wú)論使用哪一款基因轉(zhuǎn)染試劑,都應(yīng)嚴(yán)格按照該轉(zhuǎn)染試劑的說(shuō)明書進(jìn)行操作,其中包括轉(zhuǎn)染試劑的用量、基因用量、最佳轉(zhuǎn)染比例、孵育時(shí)間、檢測(cè)時(shí)間等重要因素。

六:轉(zhuǎn)染試劑有時(shí)呈云霧狀渾濁

如發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)染試劑出現(xiàn)云霧狀渾濁應(yīng)立即聯(lián)系客服人員?;蜣D(zhuǎn)染試劑一般都呈清澈透明狀態(tài),呈云霧狀渾濁可能是由于轉(zhuǎn)染試劑發(fā)生了污染或儲(chǔ)存溫度太低,請(qǐng)務(wù)必按照試劑說(shuō)明書要求的溫度進(jìn)行儲(chǔ)存。如出現(xiàn)此現(xiàn)象,建議溫浴10分鐘后,觀察是否澄清。


七:轉(zhuǎn)染復(fù)合物出現(xiàn)沉淀

當(dāng)轉(zhuǎn)染試劑和基因的用量都高于說(shuō)明書用量,或復(fù)合物的孵育體系體積小于說(shuō)明書建議時(shí),由于體系中過量的電荷發(fā)生了聚集會(huì)導(dǎo)致體系中的復(fù)合物出現(xiàn)沉淀。建議要嚴(yán)格參考說(shuō)明書的用量進(jìn)行轉(zhuǎn)染。


八:siRNA轉(zhuǎn)染時(shí),基因沉默效率不夠高

影響siRNA沉默效率的因素很多,如基因本身是否被環(huán)境中的RNA酶污染降解?或所使用的細(xì)胞是否為難轉(zhuǎn)染細(xì)胞?以及是否按照說(shuō)明書建議的用量進(jìn)行了操作等。首先應(yīng)該選擇合適的siRNA基因轉(zhuǎn)染試劑,確保細(xì)胞密度在60-70%之間,并嚴(yán)格按照說(shuō)明書建議的用量去使用操作。


九:DNA-siRNA共轉(zhuǎn)染時(shí),基因沉默效率不夠高

當(dāng)細(xì)胞同時(shí)轉(zhuǎn)染DNA和siRNA時(shí),建議使用分別轉(zhuǎn)染的方式進(jìn)行。即使用基因轉(zhuǎn)染試劑分別與DNA和siRNA進(jìn)行復(fù)合,再將兩個(gè)復(fù)合物體系分兩次分別加入到同一個(gè)裝有細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)孔中。因DNA和RNA的轉(zhuǎn)染機(jī)理不相同,如只想使用一種轉(zhuǎn)染試劑同時(shí)轉(zhuǎn)染兩種基因,建議一定要使用通用型基因轉(zhuǎn)染試劑,如EZ poly™ 系列的DNA/RNA產(chǎn)品,即可以轉(zhuǎn)染DNA又可以轉(zhuǎn)染RNA。

CleanCap??mRNA 含Capping結(jié)構(gòu)的高活性mRNA

產(chǎn)品中心 > 化學(xué) > 有機(jī)試劑 > 核酸合成用

CleanCap??mRNA
含Capping結(jié)構(gòu)的高活性mRNA

  • 產(chǎn)品特性
  • 相關(guān)資料
  • Q&A
  • 參考文獻(xiàn)

含Capping結(jié)構(gòu)的高活性mRNACleanCap??mRNA                              含Capping結(jié)構(gòu)的高活性mRNA

CleanCap? mRNA

TriLink BioTechnologies開發(fā)的CleanCap? mRNA是一種包被了特定蛋白的加帽mRNA。

本系列產(chǎn)品有Cas9、Cre、EGFP、Luciferase、mCherry、β-gal、EPO、OVA(ovalbumin)可供選擇。

TriLink公司的CleanCap? mRNA能夠作為高活性的mRNA使用,通過Capping(加帽)避免生物體內(nèi)發(fā)生免疫應(yīng)答,改善in vivo條件下的翻譯效率。

◆CleanCap? 是什么?:為mRNA添加Cap 1 結(jié)構(gòu)

TriLink公司的CleanCap? mRNA可以通過在mRNA上添加Capping結(jié)構(gòu)(Cap 1)來(lái)避免生物體內(nèi)發(fā)生免疫應(yīng)答,從而合成具有高翻譯效率的mRNA。


CleanCap??mRNA                              含Capping結(jié)構(gòu)的高活性mRNA

◆TriLink公司的CleanCap? mRNA特點(diǎn)

1. 加帽效率高達(dá)94%+,可獲得更高活性的mRNA。

2. 不會(huì)激活模式識(shí)別受體,可避免免疫應(yīng)答

3. 相較于Cap 0結(jié)構(gòu)(ARCA法加帽),in vivo條件下的翻譯效率得到了大幅改善

4. 相較于酶加帽法,所需成本大幅降低

5. 加帽修飾mRNA產(chǎn)品系列豐富

◆CleanCap?和ARCA(Anti-reverse capping analog)法的比較

將從以下兩點(diǎn)比較ARCA法和CleanCap?加帽的mRNA。

● 加帽效率

● 細(xì)胞內(nèi)蛋白的表達(dá)量

加帽效率的比較

分別使用CleanCap?和ARCA加帽表達(dá)Fluc的mRNA,比較兩者的加帽效率。

結(jié)果顯示,使用CleanCap? 獲得的加帽效率比ARCA法高。

CleanCap?

ARCA

90-99%

60-80%

CleanCap??mRNA                              含Capping結(jié)構(gòu)的高活性mRNA

細(xì)胞內(nèi)蛋白表達(dá)水平的比較

分別使用CleanCap?和ARCA法加帽表達(dá)EGFP的mRNA后,使其在細(xì)胞內(nèi)表達(dá),并通過熒光顯微鏡進(jìn)行觀察。

比較以下5種細(xì)胞:CHO cells、Foreskin fibroblast cells、iPS derived cardiomyoctyes、Jurkat、MCF 10A

結(jié)果顯示,無(wú)論在哪一種細(xì)胞中,使用CleanCap?加帽的EGFP mRNA的蛋白表達(dá)水平都更高。


ARCA EGFP mRNA

CleanCap? EGFP mRNA

   CHO Cells

   6 minute fusion Fuse-It-mRNA Kit

   1μg mRNA
   72 h post fusion

CleanCap??mRNA                              含Capping結(jié)構(gòu)的高活性mRNA

CleanCap??mRNA                              含Capping結(jié)構(gòu)的高活性mRNA

   Foreskin fibroblast cells,
   10 minute fusion Fuse-It-mRNA Kit
   1μg mRNA
   24 h post fusion

CleanCap??mRNA                              含Capping結(jié)構(gòu)的高活性mRNA

CleanCap??mRNA                              含Capping結(jié)構(gòu)的高活性mRNA

   iPS derived cardiomyoctyes,
   10 minute fusion Fuse-It-mRNA Kit
   1μg mRNA
   24 h post fusion

CleanCap??mRNA                              含Capping結(jié)構(gòu)的高活性mRNA

CleanCap??mRNA                              含Capping結(jié)構(gòu)的高活性mRNA

Data courtesy of Beniag  

ARCA EGFP mRNA

CleanCap? EGFP mRNA

   Jurkat: 500ng
   mRNA + 1μL
   jetMESSENGER

CleanCap??mRNA                              含Capping結(jié)構(gòu)的高活性mRNA

CleanCap??mRNA                              含Capping結(jié)構(gòu)的高活性mRNA

   MCF 10A: 500ng
   mRNA + 1μL
   jetMESSENGER

CleanCap??mRNA                              含Capping結(jié)構(gòu)的高活性mRNA

CleanCap??mRNA                              含Capping結(jié)構(gòu)的高活性mRNA

Data courtesy of Polyplus-transfection  

CleanCap?與酶加帽法的制備成本比較

計(jì)算4 mL(2 mg)和1 mL(400 μg)兩種規(guī)格制備加帽mRNA時(shí)所需的成本。

結(jié)果顯示,CleanCap?與酶加帽法相比,生產(chǎn)成本更低。

CleanCap??mRNA                              含Capping結(jié)構(gòu)的高活性mRNA

◆與修飾mRNA的組合:置換尿苷

為使mRNA能夠高效表達(dá),需最大限度地去除mRNA序列中的Uridine(尿苷),并將殘留的Uridine置換為Pseudo Uridine(PseudoU,假尿苷)或5-methoxy Uridine(5moU,5-甲氧基尿苷)。

TriLink公司提供多種CleanCap?與Pseudo Uridine、5-methoxy Uridine組合的mRNA產(chǎn)品。

CleanCap??mRNA                              含Capping結(jié)構(gòu)的高活性mRNA

Thp-1 Dual Cells (InvivoGen)

準(zhǔn)備2種表達(dá)Fluc的mRNA,正常序列(Standard Fluc)與盡可能去除尿苷的序列(U depleted Fluc),比較兩者的表達(dá)水平。

此外,在沒有進(jìn)行尿苷置換(wt)、置換為Pseudo Uridine(PseudoU)和置換為5-methoxy Uridine(5moU)的條件下進(jìn)行比較。

結(jié)果顯示,在U depleted Fluc(盡可能去除尿苷的序列)和置換為5-methoxy Uridine(5moU:甲氧基尿苷)的序列中,F(xiàn)luc的表達(dá)水平更高。

◆RNA定制合成服務(wù)

TriLink公司可提供RNA定制合成服務(wù):化學(xué)合成短鏈RNA服務(wù)、轉(zhuǎn)錄合成長(zhǎng)鏈RNA。定制項(xiàng)目包含加帽、修飾堿基、緩沖液組成、純化方法開發(fā)等。從使用修飾堿基的向?qū)NA合成到大規(guī)模mRNA合成服務(wù)均可提供,可滿足客戶廣泛的需求。

CleanCap??mRNA                              含Capping結(jié)構(gòu)的高活性mRNA

mRNA定制合成(in vitro轉(zhuǎn)錄合成)的服務(wù)內(nèi)容

目標(biāo)回收量:1 mg~

修飾堿基:Pseudouridine, 5-Methoxyuridine, 5-Methylcytidine/Pseudouridine等

加帽試劑:CleanCap?

定制示例

● 只需ORF序列的mRNA合成

● UTR序列和ORF序列的mRNA合成

歡迎與我們聯(lián)系,進(jìn)一步了解定制服務(wù)。

◆關(guān)于TriLink BioTechnologies

CleanCap??mRNA                              含Capping結(jié)構(gòu)的高活性mRNA


TriLink BioTechnologies是一家位于美國(guó)圣地亞哥的試劑、藥物生產(chǎn)定制公司,專注于核酸、寡核苷酸、加帽類似物的生產(chǎn)和長(zhǎng)鏈RNA合成。

CleanCap? mRNA是TriLink研發(fā)的新型共轉(zhuǎn)錄加帽法,與常規(guī)加帽法相比,可實(shí)現(xiàn)高加帽效率蛋白表達(dá)效率。

TriLink生產(chǎn)符合ICH Q7以及ISO 9001:2015。

◆產(chǎn)品列表

Cas9 mRNA

產(chǎn)品編號(hào)

產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品規(guī)格

550-33824

CleanCap Cas9 mRNA

1 mg

552-33823

100 μg

558-33744

CleanCap Cas9 mRNA (5moU)

1 mg

550-33743

100 μg

555-33754

CleanCap Cas9 Nickase mRNA (5moU)

1 mg

551-33751

20 μg

557-33753

100 μg

Cas9 mRNA是在Broad、MIT、Harvard、Iowa、UTokyo以及Rockefeller授予的限制性許可下提供的產(chǎn)品。

Cre mRNA

產(chǎn)品編號(hào)

產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品規(guī)格

555-33793

CleanCap Cre mRNA (5moU)

1 mg

559-33791

100 μg

EGFP mRNA

產(chǎn)品編號(hào)

產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品規(guī)格

555-33793

CleanCap EGFP mRNA

1 mg

559-33791

100 μg

552-33703

CleanCap EGFP mRNA (5moU)

1 mg

556-33701

100 μg

mCherry mRNA

產(chǎn)品編號(hào)

產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品規(guī)格

556-33723

CleanCap mCherry mRNA (5moU)

1 mg

550-33721

100 μg

Luciferase mRNA

產(chǎn)品編號(hào)

產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品規(guī)格

555-33813

CleanCap FLuc mRNA

1 mg

559-33811

100 μg

559-33713

CleanCap FLuc mRNA (5moU)

1 mg

553-33711

100 μg

553-33733

CleanCap Renilla mRNA (5moU)

1 mg

557-33731

100 μg

β-gal mRNA

產(chǎn)品編號(hào)

產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品規(guī)格

559-33833

CleanCap beta gal mRNA

1 mg

553-33831

100 μg

554-33763

CleanCap beta gal mRNA (5moU)

1 mg

558-33761

100 μg

EPO mRNA

產(chǎn)品編號(hào)

產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品規(guī)格

559-33774

CleanCap EPO mRNA (5moU)

1 mg

551-33773

100 μg

OVA mRNA

產(chǎn)品編號(hào)

產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品規(guī)格

558-35503

CleanCap Ova mRNA

1 mg

552-35501

100 μg

558-33783

CleanCap Ova mRNA (5moU)

1 mg

552-33781

100 μg

◆相關(guān)產(chǎn)品

加帽試劑

產(chǎn)品編號(hào)

產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品規(guī)格

559-35511

CleanCap Reagent AG

1 μmol

553-35514

5 μmol

555-35513

10 μmol

553-35531

CleanCap Reagent (3' OMe) AG

1 μmol

557-35534

5 μmol

559-35533

10 μmol

※ 本頁(yè)面產(chǎn)品僅供研究用,研究以外不可使用。


免責(zé)聲明

1. 本公司密切關(guān)注本網(wǎng)站發(fā)布的內(nèi)容,但不保證發(fā)布內(nèi)容的準(zhǔn)確性、完整性、可靠性和最新性等。

2. 本公司不保證使用本網(wǎng)站期間不會(huì)出現(xiàn)故障或計(jì)算機(jī)病毒污染的風(fēng)險(xiǎn)。

3. 無(wú)論何種原因,使用本網(wǎng)站時(shí)給用戶或第三方造成的任何不利或損害,本公司概不負(fù)責(zé)。此外,對(duì)于用戶與其他用戶或第三方之間因本網(wǎng)站發(fā)生的任何交易、通訊

3. 糾紛,本公司概不負(fù)責(zé)。

4. 本網(wǎng)站可提供的所有產(chǎn)品和服務(wù)均不得用于人體或動(dòng)物的臨床診斷或治療,僅可用于科研等非醫(yī)療目的。如任何用戶將本網(wǎng)站提供的產(chǎn)品和服務(wù)用臨床診斷或治

4. 療,以及他特定的用途或行為,本公司概不保證其安全性和有效性,并且不負(fù)任何相關(guān)的法律責(zé)任。