產(chǎn)品編號(hào)
JP010575-1L
Western快速轉(zhuǎn)膜液(Powder)
1L
45
JP010575-10L
Western快速轉(zhuǎn)膜液(Powder)
10×1L
288
生產(chǎn)的Western快速轉(zhuǎn)膜液(Powder)，即Western Rapid Transfer Buffer (Powder)，是一種粉末形態(tài)的安全無(wú)毒的用于Western時(shí)濕法快速轉(zhuǎn)膜的緩沖液。
本產(chǎn)品轉(zhuǎn)膜快速。使用本快速轉(zhuǎn)膜液時(shí)，在400mA恒流轉(zhuǎn)膜約20-25分鐘即可將聚丙烯酰胺凝膠上的蛋白轉(zhuǎn)移至PVDF膜或硝酸纖維素膜(NC膜)等印跡膜上，并且產(chǎn)熱少，轉(zhuǎn)膜效果好。而相同的條件下使用傳統(tǒng)的轉(zhuǎn)膜液需要轉(zhuǎn)膜更長(zhǎng)時(shí)間。
本產(chǎn)品安全無(wú)毒害。本產(chǎn)品為預(yù)混粉末(powder)，使用前需要用水和乙醇配制，但無(wú)需調(diào)節(jié)pH值。本產(chǎn)品不含有毒有害組分，也無(wú)需使用劇毒的甲醇等試劑。
本快速轉(zhuǎn)膜液的轉(zhuǎn)膜效果與傳統(tǒng)轉(zhuǎn)膜液一致或略優(yōu)。本快速轉(zhuǎn)膜液與傳統(tǒng)轉(zhuǎn)膜液在轉(zhuǎn)膜前后的效果比較請(qǐng)參考圖1。
圖1.Western快速轉(zhuǎn)膜液與傳統(tǒng)轉(zhuǎn)膜液在轉(zhuǎn)膜前后的對(duì)比效果圖。上圖為使用本快速轉(zhuǎn)膜液的效果圖，下圖為使用傳統(tǒng)轉(zhuǎn)膜液的效果圖，轉(zhuǎn)移電極芯組件中放置兩個(gè)轉(zhuǎn)移三明治夾進(jìn)行轉(zhuǎn)膜，僅用內(nèi)置冰盒進(jìn)行降溫。凝膠為BeyoGel? Plus PAGE預(yù)制膠(Hepes, 4-20%, 15孔) (JP010524)，凝膠厚度為1.5mm；蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)分別為彩色預(yù)染蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)(10-180kD) (JP010068/JP010069)和BeyoColor?彩色預(yù)染蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)(6.5-270kD) (JP010071/JP010072)，上樣量為6μl；傳統(tǒng)的轉(zhuǎn)膜液為Western轉(zhuǎn)膜液(JP010021A/B)；PVDF膜為PVDF膜(進(jìn)口分裝, 6.6×8.5cm, 0.45μm) (FFJP30)；轉(zhuǎn)膜設(shè)備為MiniBlot?蛋白轉(zhuǎn)膜系統(tǒng)(E6050)；轉(zhuǎn)膜電源為BeyoPower?高電流電源(300V/2000mA/200W) (E6085)。實(shí)際轉(zhuǎn)膜效果會(huì)因?qū)嶒?yàn)條件、儀器等的不同而存在差異，圖中數(shù)據(jù)僅供參考。
本快速轉(zhuǎn)膜液的Western檢測(cè)效果與傳統(tǒng)轉(zhuǎn)膜液基本一致。本快速轉(zhuǎn)膜液與傳統(tǒng)轉(zhuǎn)膜液對(duì)于大分子量目的蛋白(ZO-1、β-Catenin)和小分子量目的蛋白(GAPDH、Histone H3)的Western檢測(cè)效果比較請(qǐng)參考圖2。
圖2.Western快速轉(zhuǎn)膜液與傳統(tǒng)轉(zhuǎn)膜液對(duì)于不同分子量目的蛋白的Western檢測(cè)效果比較圖。左圖為使用本快速轉(zhuǎn)膜液的Western檢測(cè)效果圖，右圖為使用傳統(tǒng)轉(zhuǎn)膜液的Western檢測(cè)效果圖。蛋白樣品為HEK293T細(xì)胞裂解液，上樣量分別為30、20、10和5ng；抗體分別為ZO-1 Rabbit Polyclonal Antibody (AF0321)、β-Catenin Mouse Monoclonal Antibody (AF0069)、GAPDH抗體(小鼠單抗) (AG019)、Histone H3 Mouse Monoclonal Antibody (AF0009)。其它電泳和轉(zhuǎn)膜條件和圖1中完全相同。實(shí)際Western效果會(huì)因?qū)嶒?yàn)條件、儀器等的不同而存在差異，圖中數(shù)據(jù)僅供參考。
本快速轉(zhuǎn)膜液產(chǎn)熱少，外槽無(wú)須冰浴，僅用轉(zhuǎn)膜槽中的內(nèi)置冰盒進(jìn)行降溫即可。
本快速轉(zhuǎn)膜液使用便捷，無(wú)需調(diào)節(jié)pH值。
本產(chǎn)品適合手工配制的Tris-Gly和Hepes等緩沖系統(tǒng)的SDS-PAGE凝膠的轉(zhuǎn)膜，也適合Tris-Gly、Hepes和Bis-Tris系統(tǒng)等預(yù)制膠的轉(zhuǎn)膜。
使用后轉(zhuǎn)膜液可以回收，回收后可以再使用1-2次。
包裝清單：
產(chǎn)品編號(hào)
產(chǎn)品名稱
包裝
JP010575-1L
Western快速轉(zhuǎn)膜液(Powder)
1瓶
JP010575-10L
Western快速轉(zhuǎn)膜液(Powder)
JP010575-1L×10瓶
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說(shuō)明書(shū)
1份
保存條件：
室溫保存，兩年有效。
注意事項(xiàng)：
如果轉(zhuǎn)膜液顏色變成淺棕色或黃褐色，應(yīng)該丟棄。
建議使用分析純級(jí)別的乙醇或更高純度的乙醇。
如果轉(zhuǎn)膜時(shí)設(shè)定的電流或電壓較大，會(huì)有比較明顯的產(chǎn)熱現(xiàn)象，即產(chǎn)生所謂的焦耳熱(Joule heating)效應(yīng)，并導(dǎo)致轉(zhuǎn)膜液的電阻變小，最終影響轉(zhuǎn)膜效率、轉(zhuǎn)膜液的緩沖能力、甚至過(guò)熱時(shí)導(dǎo)致凝膠熔化或黏附在膜上。由于使用本產(chǎn)品時(shí)產(chǎn)熱較少，轉(zhuǎn)膜時(shí)可以僅在轉(zhuǎn)膜槽內(nèi)用冰盒降溫即可。如果同時(shí)將整個(gè)轉(zhuǎn)膜槽置于冰浴中降溫，轉(zhuǎn)膜效果更佳。同時(shí)也可以考慮轉(zhuǎn)膜液配制好后先在4℃或者冰浴預(yù)冷。
使用本產(chǎn)品轉(zhuǎn)膜時(shí)，如果設(shè)定恒流為400mA，無(wú)論是同一個(gè)轉(zhuǎn)膜槽中1或2塊膠轉(zhuǎn)膜，電壓在開(kāi)始時(shí)通常為200V左右。由于轉(zhuǎn)膜過(guò)程中，轉(zhuǎn)膜液溫度會(huì)逐漸升高，電阻變小，所以結(jié)束時(shí)電壓通常為100-150V。轉(zhuǎn)膜效率和電場(chǎng)強(qiáng)度(electric field strength, 用E表示)相關(guān)，而電場(chǎng)強(qiáng)度主要和電壓及電極之間的距離相關(guān)，即E=U/d。
由于用于轉(zhuǎn)膜的電源品牌和型號(hào)的不同，一方面最高電流差異較大，另一方面功率也會(huì)有較大差別。通常大功率的電源相對(duì)貴一些，也更適合用于轉(zhuǎn)膜。比如Bio-Rad Powerpac Basic Power Supply的最大功率是75W，在設(shè)定恒流為400mA時(shí)，電壓超過(guò)187V時(shí)就會(huì)超過(guò)電源的最大功率而出現(xiàn)過(guò)載保護(hù)。有些電源會(huì)自動(dòng)降低電壓或電流，有些則會(huì)報(bào)錯(cuò)并停止轉(zhuǎn)膜。對(duì)于出現(xiàn)停止轉(zhuǎn)膜的情況，需要調(diào)低電流或電壓，或者選擇功率更大的電源。強(qiáng)烈推薦使用的BeyoPower?中電流電源(300V/600mA/100W) (E6080)或BeyoPower?高電流電源(300V/2000mA/200W) (E6085)用于Western等的轉(zhuǎn)膜。
轉(zhuǎn)膜時(shí)轉(zhuǎn)膜液的溫度、凝膠的參數(shù)(如數(shù)量、厚度、離子濃度、丙烯酰胺濃度等)、濾紙的厚度、同時(shí)使用的轉(zhuǎn)膜槽數(shù)量、轉(zhuǎn)膜液的離子濃度、轉(zhuǎn)膜液的體積、轉(zhuǎn)膜液使用的次數(shù)等都可能會(huì)影響電流和電壓。如果需要同時(shí)使用2個(gè)或以上的轉(zhuǎn)膜槽，建議使用高電流的大功率電源，或者設(shè)定較低的電流或電壓進(jìn)行比較長(zhǎng)時(shí)間的轉(zhuǎn)膜。
轉(zhuǎn)膜時(shí)，如果出現(xiàn)報(bào)錯(cuò)而停止，需要根據(jù)情況查看是否是電壓或電流過(guò)載，或者是如轉(zhuǎn)膜液過(guò)多或過(guò)少、轉(zhuǎn)膜槽的短路或斷路等異常情況。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。