JP010533S
BeyoGel小分子量蛋白預(yù)制膠(Tricine, 16.5%, 15孔)
10塊
BeyoGel小分子量蛋白預(yù)制膠(Tricine) (BeyoGel? Tricine Precast PAGE Gel for Small Molecular Weight Protein)是一種主要用于小分子量蛋白(2-40kDa)檢測的使用安全、便捷、高品質(zhì)的常規(guī)尺寸聚丙烯酰胺預(yù)制凝膠，其電泳緩沖系統(tǒng)采用Tris-Tricine電泳緩沖系統(tǒng)，僅需60-70分鐘即可完成電泳并獲得非常平整銳利的條帶。本預(yù)制膠有1.5厘米高的濃縮膠，具有非常優(yōu)良的分離效果，電泳后蛋白條帶平整、清晰、細(xì)膩、銳利，幾乎沒有邊緣效應(yīng)；同時(shí)本預(yù)制膠膠板為玻璃材質(zhì)，減少了對蛋白的非特異性吸附，電泳效果非常好，達(dá)到甚至超過了自配PAGE膠的電泳效果；兼容市場上主流的小型電泳槽，常用于PAGE和Western檢測。
BeyoGel小分子量蛋白預(yù)制膠(Tricine)有10孔和15孔兩種孔數(shù)選擇。本預(yù)制膠為固定濃度膠，濃度為16.5%。如果有較大量的特殊濃度需求，可提供定制服務(wù)。本產(chǎn)品具體參數(shù)請參考下表：
產(chǎn)品編號
預(yù)制膠濃度
孔數(shù)
最大上樣量
電泳緩沖液體系
轉(zhuǎn)膜緩沖液體系
最佳分離范圍
JP010532
16.5%
10
60μl
Tris-Tricine
Tris-Glycine
2-40kD
JP010533
16.5%
15
30μl
Tris-Tricine
Tris-Glycine
2-40kD
本預(yù)制膠含有1.5厘米高的4%濃縮膠，可以有效確保獲得非常銳利的條帶。
本預(yù)制膠丙烯酰胺(Acrylamide)與甲叉丙烯酰胺(Bisacrylamide)的比例為29:1，凝膠厚度為1.5mm。加樣孔數(shù)為10孔的最大上樣量為60μl，加樣孔數(shù)為15孔的最大上樣量為30μl。膠板尺寸：寬×高×厚度為98×84×4.1mm；凝膠尺寸：寬×高×厚度為81×74×1.5mm。
聚丙烯酰胺凝膠電泳(Polyacrylamide gel electrophoresis, PAGE)技術(shù)廣泛用于蛋白質(zhì)、核酸及蛋白質(zhì)-核酸復(fù)合物的分離純化、檢測、鑒定、分子量分析等實(shí)驗(yàn)，是生命科學(xué)研究中最基本的實(shí)驗(yàn)技術(shù)之一。常見的Western印跡(Western blot)檢測就是基于PAGE的。Tricine-SDS-PAGE (基于Tris-Tricine緩沖系統(tǒng))通常用于分離質(zhì)量范圍為1-100kDa的蛋白質(zhì)。它是分辨小于30kDa的蛋白質(zhì)首選的電泳系統(tǒng)，對于從生物膜中分離膜蛋白復(fù)合物也很有幫助[1]。在傳統(tǒng)的Glycine-SDS-PAGE (也被稱為Laemmli-SDS-PAGE，基于Tris-Glycine緩沖系統(tǒng))中，隨著電泳的進(jìn)行，濃縮膠中來自樣品和電泳液中SDS的游離的十二烷基硫酸根(Dodecyl sulfate, DS)離子持續(xù)累積，并與小分子量蛋白的結(jié)合，阻礙了小分子量蛋白的分離，從而導(dǎo)致條帶模糊和分辨率降低，干擾小分子量蛋白的固定和染色。在Tricine-SDS-PAGE中，凝膠緩沖液的pH值較低，并在電泳緩沖液中用Tricine替代Glycine，盡可能地降低了DS離子與小分子量蛋白的結(jié)合，使小分子蛋白很好地分離，呈現(xiàn)了更清晰的條帶和更高的分辨率。同時(shí)，Tricine的pKa值為8.15，Glycine的pKa值為9.6，由于pKa的變化，兩種方法對高或低分子量蛋白質(zhì)的分辨率也各不相同。Glycine-SDS-PAGE的凝膠可以分離高分子量蛋白質(zhì)(20-200kDa)，但即使是使用較高的丙烯酰胺(Acrylamide)濃度的凝膠(4-20%梯度凝膠)，小于20kDa的蛋白質(zhì)也較難清楚地分離和擴(kuò)散。相比之下，Tricine-SDS-PAGE只能用于分離低于100kDa的蛋白質(zhì)，尤其是20kDa或更低分子量的蛋白質(zhì)或多肽可以通過這種方法很好地分離[2]。此外，Tricine-SDS-PAGE有助于在蛋白質(zhì)印跡過程中輕松轉(zhuǎn)移疏水性蛋白質(zhì)，適用于從二維凝膠中分離疏水性蛋白質(zhì)以進(jìn)行質(zhì)譜分析[3]。
的BeyoGel?小分子量蛋白預(yù)制膠(Tricine)使用略偏堿性pH的Tris緩沖液制備，具有較低的pH值，盡可能地減少了蛋白質(zhì)修飾，適用于變性蛋白電泳。
本預(yù)制膠使用Tris-Tricine緩沖系統(tǒng)的SDS-PAGE電泳液，推薦使用的BeyoGel Tricine-SDS Cathode Running Buffer (10X) (JP010751)和BeyoGel Tricine-SDS Anode Running Buffer (10X) (JP010752)，或參考使用說明自行配制相應(yīng)的電泳液。
本預(yù)制膠電泳后可以使用Tris-Glycine緩沖系統(tǒng)的轉(zhuǎn)膜液進(jìn)行轉(zhuǎn)膜，推薦使用Western轉(zhuǎn)膜液(JP010021A或JP010021B)。
關(guān)于10孔和15孔預(yù)制膠的選擇：需要檢測的樣品數(shù)量多或者需要定量時(shí)，推薦使用15孔預(yù)制膠，通量更大、更便于進(jìn)行較多樣品的定量統(tǒng)計(jì)分析；需要獲得非常漂亮的代表性圖片時(shí)，推薦使用10孔預(yù)制膠，10孔預(yù)制膠獲得的條帶更加平整和銳利。
本產(chǎn)品具有超高分辨率。本預(yù)制膠最小可分離1.7kDa的蛋白。
本產(chǎn)品使用安全、便捷。本預(yù)制膠無需配制，即開即用，去掉梳子即可上樣，而傳統(tǒng)的PAGE配制凝膠繁瑣費(fèi)時(shí)，并且制膠時(shí)還會(huì)接觸有毒和刺激性試劑。
本產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定。本預(yù)制膠采用高品質(zhì)玻璃膠板，和塑料膠板相比，大大減少了膠板對蛋白的吸附，電泳效果更好。本產(chǎn)品采用自動(dòng)化的灌膠生產(chǎn)技術(shù)，品質(zhì)穩(wěn)定可靠，重復(fù)性好，不同批次的產(chǎn)品一致性高。
本產(chǎn)品電泳效果好。本預(yù)制膠的蛋白質(zhì)分離效果極佳，蛋白條帶平整、清晰、細(xì)膩、銳利，轉(zhuǎn)膜效率高。
本產(chǎn)品電泳槽兼容性好。本預(yù)制膠兼容市場上主流的小型電泳槽，如的MiniProGel蛋白制膠與電泳系統(tǒng)(E6001/E6005)、Bio-Rad公司的Mini-PROTEAN Tetra Cell電泳槽、Life公司的XCell SureLock Mini-Cell電泳槽(需與免費(fèi)提供的特制擋板配合使用)、以及上海天能、北京六一等的mini膠電泳槽或其它膠板寬度在10厘米的電泳槽。
本產(chǎn)品電泳時(shí)間短。本預(yù)制膠推薦的電泳電壓和電泳時(shí)間為150V 40-50分鐘，即可完成電泳并獲得非常平整和銳利的電泳條帶。具體的電泳時(shí)間可以根據(jù)溴酚藍(lán)的電泳位置或?qū)嶒?yàn)的具體需求進(jìn)行確定。
本產(chǎn)品取出凝膠極為便捷。只需用刀片在玻璃膠板一側(cè)輕輕劃一下即可，并且玻璃膠板打開極為方便，無需特殊的起撬工具。
產(chǎn)品編號
產(chǎn)品名稱
包裝
JP010533S
BeyoGel小分子量蛋白預(yù)制膠(Tricine, 16.5%, 15孔)
10塊
保存條件：
4℃保存，1個(gè)月有效。切勿置于0℃以下冷凍。
注意事項(xiàng)：
由于本預(yù)制膠保質(zhì)期較短，需新鮮制備，在您確認(rèn)訂購后約3-5個(gè)工作日才能發(fā)貨。
本預(yù)制膠不能置于0℃以下冷凍，否則凝膠會(huì)凍裂。
內(nèi)槽電泳液和轉(zhuǎn)膜液建議新鮮配制，試劑純度不夠、反復(fù)使用或長期放置的緩沖液會(huì)降低電泳效果。
本預(yù)制膠為了兼容幾乎所有廠家的小型凝膠電泳槽，所以改進(jìn)了與電泳槽U型硅橡膠密封條的吻合結(jié)構(gòu)(如、Bio-Rad等公司的電泳槽)。建議在電泳時(shí)須將具有突起結(jié)構(gòu)的U型硅橡膠密封條取出后反過來安裝，使其沒有突起的平滑面朝外，從而防止漏液，見下圖。一般內(nèi)槽電泳液加滿，外槽電泳液沒過電泳槽底部的陽極即可，并且電泳結(jié)束后的電泳緩沖液可以作為外槽緩沖液重復(fù)使用1-2次。另外，部分公司都已經(jīng)配套無突起結(jié)構(gòu)的U型硅橡膠密封條，使用這樣的U型硅橡膠密封條就不會(huì)出現(xiàn)內(nèi)外槽之間的漏液現(xiàn)象。
圖1. 、Bio-Rad等公司的電泳槽U型硅橡膠密封條的突起結(jié)構(gòu)圖。由于的BeyoGel? PAGE預(yù)制膠的該部位是平的，使其兼容幾乎所有廠家的小型膠電泳槽，所以電泳時(shí)須將具有突起結(jié)構(gòu)的硅橡膠密封條(左圖)取出后反過來安裝(右圖)，使其沒有突起的平滑面朝外，從而防止漏液。
由于的BeyoGel PAGE預(yù)制膠比Life公司的XCell SureLock Mini-Cell電泳槽配套的NuPAGE Gel或Novex Mini Gel略薄，所以需加特制擋板配合使用。如有需要，請?jiān)谟嗁彵井a(chǎn)品時(shí)告知，會(huì)免費(fèi)贈(zèng)送該特制擋板。
轉(zhuǎn)膜時(shí)，建議將轉(zhuǎn)膜液中的乙醇或甲醇含量提高至20%-30%，以提高小分子蛋白的轉(zhuǎn)膜效率。同時(shí)建議使用0.22μm的印跡膜進(jìn)行轉(zhuǎn)膜(FFJP20/FFJP20/FFJP20)。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
