產品編號
JJJP7
Human MSP ELISA Kit
96次
3398
的Human MSP ELISA Kit (Human Macrophage Stimulating Protein Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit)，即人巨噬細胞刺激蛋白酶聯(lián)免疫吸附檢測試劑盒，是一種用于特異性地高靈敏地定量檢測人血清、血漿或細胞培養(yǎng)上清液中的MSP的ELISA試劑盒。
本產品檢測靈敏度高，特異性強，重復性好。多次重復檢測結果表明，最小檢出量為96pg/ml，與人的HGF、MSP-a、MSP-β、小鼠MSP等均沒有交叉反應，板內、板間變異系數(shù)均小于10%。
巨噬細胞刺激蛋白(Macrophage Stimulating Protein, MSP)，又稱為肝細胞生長因子樣蛋白(HGF-like Protein)，屬于生長因子HGF家族。MSP包含一個PAN/APPLE樣區(qū)域、四個三環(huán)結構域和一個不具有酶活性的蛋白酶S1域。人MSP與小鼠MSP具有79%的氨基酸同源性。MSP主要由肝細胞以無活性的前體蛋白形式分泌，在組織受損時，游離的pro-MSP經酶切作用得到具有生物活性的異質二聚體，該二聚體包含分子量在45-62kDa的α鏈和分子量在25-35kDa的β鏈，二者之間由二硫鍵連接。在急性腎衰竭以及類肉瘤狀和支氣管擴張患者中，血清MSP水平會出現(xiàn)升高。
MSP或單獨的β鏈都能以較高的親和力與酪氨酸激酶受體MSP R/Ron結合，但只有MSP能夠引發(fā)信號傳遞。MSP R主要表達在巨噬細胞以及皮膚、肺、消化道和女性生殖系統(tǒng)上皮細胞中。分泌型MSP R同樣也能夠與MSP結合，但會抑制MSP R依賴的信號傳遞。在多種腫瘤中，MSP R表達會出現(xiàn)上調，MSP R的激活也會有利于腫瘤的轉移。
MSP對巨噬細胞介導的炎癥反應具有兩方面的影響。MSP能夠增強巨噬細胞遷移、呼吸爆發(fā)和對細菌感染物的吞噬作用。反之，MSP也能抑制在IPS或IFN誘導下巨噬細胞和類風濕性關節(jié)炎滑膜成纖維細胞炎癥調節(jié)因子的產生。MSP能夠促進角質細胞、腎小管上皮細胞和腎小球系膜細胞的增殖，增強破骨細胞介導的骨重吸收。MSP能夠抑制早期髓系造血祖細胞的分化和增殖。MSP還能作為一種神經元營養(yǎng)因子，促進神經元細胞存活和神經突觸延伸。
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法(Sandwich?ELISA)檢測樣品中人MSP的濃度，其原理見圖1。人MSP特異的單克隆捕獲抗體已預包被于酶標板上，當加入標準品或樣品時，其中的人MSP會與捕獲抗體結合。當加入生物素化的抗人MSP抗體后，生物素化抗人MSP抗體與人MSP結合，形成夾心的免疫復合物。隨后加入辣根過氧化物酶標記Streptavidin?(HRP-Streptavidin)，由于生物素與鏈霉親和素(Streptavidin)可以特異性地結合，因此鏈霉親和素連接的HRP就會與夾心的免疫復合物連接起來而被固相捕獲。最后加入顯色劑TMB溶液，固相捕獲的辣根過氧化物酶就會催化無色的顯色劑氧化成藍色物質，在加入終止液后呈黃色。通過酶標儀檢測450nm處的吸光度值就能實現(xiàn)定量檢測。人MSP濃度與A450值呈正比，通過繪制標準曲線，對照樣品吸光度值，即可計算出樣品中人MSP濃度。
圖1. 雙抗體夾心ELISA原理圖。
一個包裝的本試劑盒，包括標準品檢測，可以進行96次檢測。
包裝清單：
產品編號
產品名稱
包裝
JJJP7-1
人MSP抗體預包被板
8孔×12條
JJJP7-2
標準品稀釋液(5X)
20ml
JJJP7-3
人MSP標準品
2-4瓶
JJJP7-4
人MSP生物素化抗體
10ml
JJJP7-5
辣根過氧化物酶標記Streptavidin
10ml
JJJP7-6
洗滌液(20X)
30ml
JJJP7-7
TMB溶液
10ml
JJJP7-8
終止液
5ml
JJJP7-9
封板膜(透明)
2張
JJJP7-10
封板膜(白色)
2張
–
說明書
1份
保存條件：
標準品4℃保存，1-2周內有效，-20℃保存6個月內有效；試劑盒其它組分4℃保存6個月內有效。除標準品外，試劑盒其它組分嚴禁凍存。
注意事項：
由于標準品一般是凍干粉，在制備后需要嚴格校準，所以標準品的瓶數(shù)及每瓶標準品所需加入的稀釋液體積請以實際收到的試劑盒及標準品標簽上的標注為準。
洗滌液(20X)在低溫下可能有結晶，如果發(fā)現(xiàn)有結晶，請室溫水浴加熱使結晶完全溶解后再配制工作液。
為保證標準品的精確性，標準品配制使用后，如果有剩余請勿再次使用。
TMB溶液請勿接觸氧化劑和金屬，否則容易失效。
加樣時，請注意每個樣品或標準品必須更換槍頭，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取體積的誤差。
由于本試劑盒均經過獨立測試，所以請勿混用不同貨號和不同批次的試劑盒組分，即使是同種試劑盒不同批次的試劑盒組分也不能混用。多個試劑盒同時檢測時，請獨立使用各個試劑盒中的試劑，請勿使用不同試劑盒中相同名稱的組分。
充分混勻對保證反應結果的精準性很重要，在加液后請輕輕晃動整個96孔板，以保證混勻。
本試劑盒很多操作在室溫進行，要求嚴格控制室溫在25-28℃。溫度低于25℃會導致最終檢測到的吸光度顯著下降。
洗滌過程非常重要，洗滌不充分會使精確度下降并導致結果誤差較大。
檢測標準品和樣品時建議設置重復孔，以確保檢測結果的可信度。
加樣過程中須避免氣泡的產生。
本產品僅限于專業(yè)人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內。
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。